编号：生物农药研究中心[生测-061120], 共4页 承担单位：福建省农科院.DOC

编号：[生测-061120], 共页 承担单位：福建省农科院生物技术研究所 课题编号： 课题名称： 课题负责： 子课题名： 子课题号： 子课题人： 子项目名： 试验项目：番茄带病植株内生菌的分离 试验人员：焦会民 王秋红 试验负责： 焦 会 民 报告日期：2006－11－20 计数月份：2006.10 福建省农业科学院生物技术研究所 生物农药研究中心 电话: 0591 传真: 0591 试验目的 植物青枯病是由青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的毁灭性土传病害，广泛分布于热带、亚热带及温带地区[1]。目前缺乏有效的药剂防治，主要依靠抗病品种。生物防治成为防治青枯病的重要手段之一。植物内生菌是指其生活史的一定阶段生活在活体植物组织内，又不引起植物明显病害的微生物[2]。植物内生菌中存在着大量的具有拮抗活性的菌株，且内生菌存在于植物组织中，具有稳定性高，低毒等特性，利用植物内生菌进行生物防治具有很大的潜力。本试验主要分析植株不同部位体内内生菌的分布特性，以及内生菌种群的结构特2.2内生菌的分离方法 1）将采回按上部茎、中部茎、下部茎部位截取并称重 2）将各部位样品分别在75%酒精中浸泡2s，然后用次氯酸钠消毒3min，无菌水冲洗3次 3）用灭菌的滤纸吸干水分，加100ml无菌水于榨汁机中研磨成匀浆 4）移取研磨液5）取每个稀释度的菌液0.ml均匀地涂布于NA培养基的平板上，平板于30℃人工气候箱中培养根据菌落的形态、颜色、大小、光泽、硬度、透明程度、表面情况等特征以及显微镜镜检的特征来鉴别不同的菌株。 采用平板菌落计数法计算菌落 内生菌种类 菌落特征 菌落数 含菌量cfu/g 根部 3 颜色较浅，有白边，中间凸起。 较小菌落，白色透明 黄色菌落，圆形，中间凸起。 150 100 50 3.17×107 2.1×107 1.1×107 茎上 3 黄色菌落，圆形，中间凸起 白色较大菌落，边缘规则。 颜色较淡黄色菌落，边缘不整齐。 100 200 50 5.3×109 1.04×1010 2.6×109 茎中 1 1.黄色小菌落，圆形，无光泽。中间凸起。 19 9.9×106 茎基 2 1.白色菌落，中间凸起，菌落较小，圆形 2.透明状，菌落较大，中间凸起，有光泽， 11 41 2.11×106 7.9×106 图片1：番茄带病植株茎基部 图片2：番茄带病植株根部 图片3：番茄带病植株茎上部 图片4：番茄带病植株茎中部 试验结论 从实验结果来看，带病番茄植株在茎上部的菌含量最大，达到9个数量级，再依次是根部，茎中部，茎基部。 总共分离到9株内生细菌，这些都是从形态上初步判断不是同一种，还需要进一步做鉴定。 参考文献 [1]龙良鲲，肖崇刚，窦彦霞．防治番茄青枯病内生细菌的分离与筛选．中国蔬菜，2003，（2）：19-21． [2]姜怡，杨颖，陈华红等．植物内生菌资源．微生物学通报，2005，32（6）：146-147． 茎基部 茎上部 茎中部 健康番茄植株 5.6.7 5.6.7. 5.6.7. 4.5.6 病的番茄苗 5.6.7. 5.6.7 5.6.7. 7.8.9. 表2：番茄健康各部位称重原始数据 种类 根 茎下部 茎中部 茎上部 病株 4.73 5.19 6.08 1.92 健株 3.39 3.47 2.5 1.61