棉铃虫不同发育阶段微粒体P450酶系组成和活性的比较.pdfVIP

第 44 卷 第 2 期 昆 　虫 　学 　报 Vol 44 , No 2 2001 年 5 月 ACTA EN TOMOLO GICA SIN ICA May , 2001 棉铃虫不同发育阶段微粒体 P450 酶系 组成和活性的比较 邱星辉 , 李　薇 , 冷欣夫 ( 中国科学院动物研究所, 农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室 , 北京　100080) 摘要 : 比较了棉铃虫 Helicoverpa armigera 6 龄幼虫、蛹、成虫微粒体 P450 单加氧酶系组成及其 活性。P450 含量在 6 龄幼虫中肠 (脂肪体 = 蛹) 成虫 , NADPH细胞色素还原酶在幼虫中肠 幼虫脂肪体 蛹 成虫 ; 6 龄幼虫脂肪体微粒体与蛹脂肪体微粒体 P450 含量相近 , 但 NADPH 细胞色素还原酶活性前者是后者的 4 2 倍 ; 成虫微粒体的细胞色素 P450 和 NADPH 细胞色素 P450 还原酶含量很低 , 几乎未检测出。用对硝基苯甲醚和艾氏剂为底物测定 P450 酶系活性表 明 , 与 6 龄幼虫相比 , 蛹和成虫具有极低的单加氧酶活性 , 其 O脱甲基酶活性未检出 , 艾氏剂环 氧化酶活性比幼虫低 2～3 个数量级。 关键词 : 棉铃虫 ; P450 单加氧酶 ; 生长发育表达 中图分类号: Q9659 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : (2001) 作为全变态昆虫 , 棉铃虫 Helicoverpa armigera 一生经历卵、幼虫、蛹、成虫 4 个发育阶 段 , 表现为 4 种不同虫态。不同虫态的棉铃虫所处的生活环境迥异 , 其抵御外来化学压力的 方式可能不同。鳞翅目昆虫大多以幼虫取食为害 , 其 P450 酶系在幼虫期的生长发育表达受到 重视[1～4 ] , 而有关蛹、成虫、卵等虫态的 P450 酶系特征报道较少。为揭示对外来物质起重 要作用的 P450 酶系在棉铃虫不同发育阶段的表达规律 , 我们比较研究了幼虫、蛹、成虫 3 个 时期的棉铃虫微粒体 P450 酶系特征。 1 　材料和方法 11 　化学试剂 NADPH 、NADH ( 98 %) 、D TT ( 1 ,4 Dithiothreitol , 97 %) 为B. M 产品 , 牛血清 ( ) ( ) 白蛋白 BSA 购自 Sigma 公司 , PMSF phenylmethylsulfonyl fluoride 为 Serva 产品 , Aldrin , Dieldrin ( 99 %) 为 RIEDELDEHAENA GSEEL ZEHANNOV ER 生 产 , PTU (phenylthiourea) 等其它试剂为国产分析纯。 12 　试虫 棉铃虫为室内种群 , 虫源由本所吴坤君研究组友好赠送。饲养环境为 (25 ±1) ℃, 光照 ( ) 基金项目 : 国家自然科学基金资助项目 收稿日期 :; 接受日期 : ·142 · 第 2 期 邱星辉等 : 棉铃虫不同发育阶段微粒体 P450 酶系组成和活性的比较 143 昼∶夜为 14 ∶10 , 人工饲料喂养[5 ] 。幼虫为6 龄 3 日龄, 蛹为化蛹 3～5 天 , 成虫羽化 2 日内, 未经取