泰来草染色体的核型分析.DOCVIP

泰来草染色体的核型分析( 廖亮亮，谢志，赵博，王林桂*，黄勃* （海南大学海洋学院海洋科学系，海南 海口，570228） 摘要：利用染色体常规压片的技术,对泰来草（Thalassia hemprichii）进行了染色体数目和核型的研究及分析。结果表明, 泰来草的体细胞染色体数目2n=18, 为二倍体，核型公式为2n=2X=18=16m+2sm。未发现随体，核型属于“1A”型，属于对称核型。 关键词：泰来草；染色体；核型 水鳖科Hydrocharitaceae)植物是热带、亚热带地区广泛分布的单子叶水生植物，共有17属约80种，其中3属为海草，我国有9属约20种[]。水鳖科植物染色体的研究主要集中在数目上Limnobium属海神草属大叶藻属聚伞藻属海菖蒲属、泰来草属和喜盐草属海菖蒲属E.acoroides[5]、泰来草属的T.testudinum[9]和喜盐草属的H.ovalis、H.ovata 、H.stipulacea[4-6]，国内关于海草染色体数目和核型未见报道。泰来草（Thalassia hemprichii）属于水鳖科(Hydrocharitaceae)，泰来草属（Thalassia），是一种典型的热带性海草，在我国主要分布于台湾，广东的汕头，海南的文昌、琼海、陵水和三亚，西沙群岛，是我国南海海草场的主要物种之一[11]。本文对泰来草染色体的数目和核型进行研究，为海草的分类及亲缘关系、种质资源鉴定、物种多样性等的研究提供必要的细胞学依据。 1 材料与方法 1.1 材料来源 本实验材料泰来草（Thalassia hemprichii）于2009年8月采自于海南省陵水黎安港海草特别保护区。凭证标本保存于海南大学海洋学院。 染色体制片采用常规压片法，取材于早上8:00—10:00，剪取健康植株侧根的幼嫩、乳白色根尖部分1~2cm浸于0.1%秋水仙素溶液中室温下预处理1.5-2h，然后用卡诺氏液（无水乙醇：冰醋酸=3:1）于4℃冰箱中固定4-20h，取出固定后的样品，蒸馏水冲洗3次后，放入1mol/L HCl溶液中，在60℃水浴条件下解离8-18min，接着将解离后的根尖小心取出，用蒸馏水洗净后转移至0.075 mol/L 的KCl溶液中低渗约15min，将样品从低渗液中取出后，置载玻片上，切取根尖分生区滴加卡宝品红染色液染色15-20min，最后盖上盖玻片并用解剖针的针柄轻敲使分生区细胞分散开。镜检并统计染色体数，然后选取处于分裂中期且染色体分散良好的细胞在Olympus BH-4显微镜下拍照做核型分析。统计50个细胞，以其中85%以上细胞具有恒定一致的染色体数作为该种的染色体数[12]（李懋学和陈瑞阳，1985）。按照Levan（1964）[13]标准确定着丝粒位置，根据Stebbins（1971）[14]核型分类标准划分核型类型。 在显微镜下对泰来草分散良好的50个中期分裂相进行统计，并选择染色体数目清晰完整的分裂相，分别测量和计算各对染色体的相对长度、相对长度系数、臂比（见表1）。结果表明：泰来草的中期分裂相大多数为二倍体，未发现非整倍性变异，50个分散良好的中期分裂相中有45个的染色体数目为18，占分裂相总数的90%，泰来草的体细胞染色体数目2n=18, 为二倍体。具中部着丝粒的有8对， 具近中部着丝粒的有1对，核型公式为2n=2X=18=16m+2sm。在本试验条件下未观察到随体染色体。相对长度范围为7.782-14.958%，最长与最短染色体之比为1.92，臂比大于2的染色体0对，所占的比例为0，臂比值为1.38，核不对称系数为59.38，核型属于“1A”型。泰来草的形态和核型图、模式图见图1和图2。 组别 臂比 类型 相对长度系数 符号 着丝点指数 短臂 长臂 全长 1 7.153 7.80 14.958 1.09 m 1.35 L 47.82 2 6.476 7.72 14.196 1.19 m 1.28 L 45.62 3 5.7 7.42 13.12 1.3 m 1.18 M2 43.45 4 5.426 6.68 12.101 1.23 m 1.09 M2 44.84 5 4.283 6.13 10.409 1.43 m 0.94 M1 41.15 6 3.552 6.13 9.678 1.72 sm 0.87 M1 36.7 7 3.707 5.46 9.169 1.47 m 0.83 M1 40.43 8 3.477 5.12 8.593 1.47 m 0.77 M1 40.46 9 3.056 4.73 7.782 1.55 m 0.7 S 39.27 注：m为中部着丝粒染色体，sm为近中部着丝粒染色体 图1 泰来草的染色体形