第二周稀释平板计数法.pptVIP

实验二稀释平板计数法－－活菌计数 一、目的与要求： 1、了解微生物的分离与纯化原理。 2、学习无菌操作技术。 3、了解活菌计数法要点。 无菌操作三要点 静 使无菌操作室空气流动尽可降低 关好门窗, 避免空气流动过快; 不宜四处走动; 操作者不讲话,他人也不要在操作处讲话. 快 操作熟炼, 动作快速, 使接种器具暴露在 空气中的时间缩短. 轻 打开或盖上瓶口的动作要轻; 接种操作动作要轻. 从土壤中分离自生固氮菌 一、实验原理 微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。 细菌数量大于放线菌，真菌量最少 微生物得稀释平板记数使根据在固体培养基上所形成得一个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成，且肉眼可见得子细胞群体这一生理及培养特征进行得。 样品稀释液的制备用手或置摇床上充分振荡，使微生物细胞分散 二、操作步骤 （1）土壤稀释液的制备：按“稀释平板测数法” 进行，按无菌操作法将土壤稀释至10-7即可。 （2）平板接种培养（混菌法）： 吸10-４，10-５，10-６，10-７土壤悬液1ML到灭菌平板内，再倒入冷却至50 ℃培养基。 平板接种培养 （1）混合平板培养法 （2）涂抹平板计数法 下一周做 （3）倒放置培养箱中培养，28oC培养3~4天后，在有混浊半透明的胶状菌落出现，有的在后期会产生褐色的色素。 （４）观察菌落形态及计数 稀释平板计数法 将实验结果填入下表 * 稀释平板计数法 对样品稀释培养，据形成的菌落数计数。 优点：传统计数方法。对设备要求不高。活菌计数 10-3 10-5 10-4 10-6 1克样品总菌落数 平均 3 2 1 平均 3 2 1 平均 3 2 1 菌落数 10-5 10-4 10-3 稀释度 *