小麦杀配子染色体单体附加系CS－2C的DNA甲基化变异 - 核农学报.PDF

核 农 学 报　 ２０１６，３０（７）：１２８１～１２８７ １２８１ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号：１０００⁃８５５１（２０１６）０７⁃１２８１⁃０７ 小麦杀配子染色体单体附加系ＣＳ－２Ｃ 的 ＤＮＡ 甲基化变异分析 杨丽娟　 敖　 游　 王　 丹　 白　 琰　 赵洁宇　 郭长虹 （哈尔滨师范大学生命科学与技术学院／ 黑龙江省分子细胞遗传与遗传育种重点实验室，黑龙江 哈尔滨　 １５００２５） 摘　 要：本研究利用ＭＳＡＰ方法检测普通小麦中国春（ＣＳ）、中国春－杀配子染色体２Ｃ单体附加系（ＣＳ－２Ｃ 单体附加系）的ＤＮＡ 甲基化变异，探究ＤＮＡ 甲基化与杀配子染色体的关系。 结果表明，ＣＳ－２Ｃ单体附加 系５′－ＣＣＧＧ位点的胞嘧啶甲基化水平（４５３３％）高于ＣＳ（４０３５％），其中全甲基化率与半甲基化率均有 所升高。 与ＣＳ相比，ＣＳ－２Ｃ单体附加系的５′－ＣＣＧＧ位点发生了明显的胞嘧啶甲基化模式变异，以胞嘧 啶甲基化升高为主，其中ＣＧ位点甲基化变异幅度高于ＣＨＧ位点甲基化变异幅度。 通过对甲基化差异片 段进行测序鉴定，结果显示部分差异片段与普通小麦Ｓｕｋｋｕｌａ⁃ｌｉｋｅ 转座子等具有高度同源性。 由此推测， 转座子可能在杀配子作用机制中起作用。 本研究为揭示杀配子染色体的分子机制奠定了基础。 关键词：小麦；杀配子染色体２Ｃ；染色体断裂；甲基化；甲基化敏感扩增多态性 ＤＯＩ：１０１１８６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１２０１６０７．１２８１ 　 　 来自山羊草属（Ａｅｇｉｌｏｐｓ）的一些染色体导入普通小 杀配子染色体具有断裂诱导和断裂抑制双重功 麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）后，可诱发不含该条外源染色 能，可使缺少它的配子发生染色体断裂，同时保护含有 ［１２］ ［１３］ 体的普通小麦配子中的染色体断裂并产生染色体缺失、 它的配子染色体免受其杀配子作用 。 Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ 易位等畸变，这类染色体被称为杀配子染色体 于２００５年提出杀配子作用假设模型，当杀配子基因进 ［１－２］ （ｇａｍｅｔｏｃｉｄａｌ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ） 。 根据杀配子染色体作 入到普通小麦基因组后，同时会产生限制酶和类似于 ［３］ 用强度的不同，可将其分为致死和半致死型 。 在普通 甲基化酶的修饰酶。 限制酶能识别并消化特异性的限 小麦中国春（ＣＳ）遗传背景下，附加来自柱穗山羊草 制位点，如果该位点经修饰酶作用而被甲基化，则限制 （Ａｅｇｉｌｏｐｓ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ，ＣＣＤＤ，２ｎ ＝２８）的杀配子染色体 酶不能切断此位点。 如果修饰酶的功能不完全并且不 ２Ｃ，其杀配子作用强度属于半致死型，可诱导部分染色 能保护所有限制性位点，那么将会出现一定频率的染 体断裂使后代产生易位、缺失等染色体结构畸变，而同 色体断裂。 因此，不带有杀配子染色体的配子会发生 样条件下附加来 自离果山羊草（Ａｅｇｉｌｏｐｓ ｔｒｉｕｎｃｉａｌｉｓ， 败育，而带有杀配子染色体的配子可以存活下来。 ｄｅ ［１４］ ［１５］ ＵＵＣＣ，２ｎ＝２８）的杀配子染色体３Ｃ，则会引起大量的染 ｌａｓ Ｈｅｒａｓ等 、Ｓｕ 等 利用去甲基化试剂５ －氮胞