实验二有关色谱参数的测试和计算.docVIP

一．目的(Objective) 通过本实验基本色谱参数的测定与计算，定量地了解溶质组分在色谱柱过程中热力学和动力学作用的量度。 理解各色谱参数的意义及其相互关系。 通过本实验进一步掌握柱效、柱选择性、分离能力、保留值等性质，使之能选择出最佳色谱操作条件，得到可靠的定性、定量结果。 掌握保留指数的概念及测定方法 在没有标样情况下，学会利用文献上保留指数定性。 二、基本原理(Principle) 在规定的色谱条件下，测定惰性组分的死时间（tM）及被测组分的保留时间（tR）、半高峰宽（Wh/2）及峰宽（W）等参数，便可计算出基本色谱参数值。 在一定的色谱条件下，组分的保留指数为一定值，可用下式计算： Ix=100〔Igγx,z/Igγz+1,z+Z〕 计算结果与文献值对照即可定性，本实验用此方法定性酯类中的乙酸乙酯。 三、仪器与试剂(Equipment and Reagents) 1．仪器：安捷伦7890气相色谱仪，FID检测器(detector)。 2．试剂：正已烷(Hexane) 、正庚烷 (Heptane)、乙酸乙酯(Ethyl acetate) 四．实验步骤(Procedure) 1．联结好仪器系统，检查并调试仪器至正常工作状态。 2．毛细管色谱柱：DB-1701柱(Column)，柱条件：30m×0.32mm×0.25μm 3．色谱条件(Gas chromatography unit)：TD=200℃；TC=45℃；TV=200℃；载气(Carrier gas)： 暨南大学本科实验报告专用纸(附页) 组分 保留值 正己烷 乙酸乙酯 正庚烷 死时间(min) 2.374 保留时间(min) 2.437 2.885 3.994 调整保留时间(min) 0.063 0.511 1.620 3、正己烷、正庚烷、乙酸乙酯的半高峰宽和峰宽值： 组分 宽度 正己烷 乙酸乙酯 正庚烷 半高峰宽(min) 0.0314 0.0343 0.0410 峰宽(min) 0.0534 0.0583 0.0967 4、各基本参数计算： (1) 调整保留时间： (2)相对保留值： (3)容量因子： 暨南大学本科实验报告专用纸(附页) (5)分离度： 组分 参数 正己烷 乙酸乙酯 正庚烷 调整保留时间(min) 0.063 0.511 1.620 相对保留值 8.11 25.71 容量因子 0.027 0.215 0.682 理论塔板数 33323 39181 27295 分离度 8.021 20.75 (以正己烷为相对参考组分) 六、注意事项 1、色谱基本参数的测定，要严格控制操作条件的稳定性，否则易产生误差； 2、为了保护色谱柱，要求载气首先打开，然后开机，结束时先关机，后关载气，严格按照要求顺序开启和关闭色谱仪 七、问题讨论 1、当下列参数改变时:(1)柱长缩短,(2)固定相改变,(3)流动相流速增加,(4)相比减少,是否会引起分配系数的改变?为什么? 答：固定相改变会引起分配系数的改变,因为分配系数只于组分的性质及固定相与流动相的性质有关.，所以（1）柱长缩短不会引起分配系数改变（2）固定相改变会引起分配系数改变（3）流动相流速增加不会引起分配系数改变（4）相比减少不会引起分配系数改变 2、试以塔板高度H做指标,讨论气相色谱操作条件的选择. 答：（1）选择流动相最佳流速。 （2）当流速较小时，可以选择相对分子质量较大的载气（如N2,Ar)，而当流速较大时，应该选择相对分子质量较小的载气（如H2,He),同时还应该考虑载气对不同检测器的适应性。 （3）柱温不能高于固定液的最高使用温度，以免引起固定液的挥发流失。在使最难分离组分能尽可能好的分离的前提下，尽可能采用较低的温度，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。 （4）固定液用量：担体表面积越大，固定液用量可以越高，允许的进样量也越多，但为了改善液相传质，应使固定液膜薄一些。 （5）对担体的要求：担体表面积要大，表面和孔径均匀。粒度要求均匀、细小（但不宜过小以免使传质阻力过大） （6）进样速度要快，进样量要少，一般液体试样0.1~5uL,气体试样0.1~10mL. (7)气化温度：气化温度要高于柱温