lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察.pptVIP

一 教学要求 巩固细胞免疫的相关知识 学习免疫细胞分离的原理及方法 掌握巨噬细胞的分离方法 二 实验原理 巨噬细胞（MΦ）发育：骨髓多能干细胞→定向干细胞（髓样干细胞）→单核母细胞→前体单核细胞→单核细胞→血液→组织（分化为巨噬细胞） MΦ分布：单核细胞主要于血液中，巨噬细胞几乎存在于所有表皮和黏膜下组织。 MΦ形态：有伪足，马蹄状单核，细胞形体大。 MΦ分离纯化：小鼠和大鼠腹腔内有丰富的巨噬细胞，可用腹腔清洗的方法获得较多细胞悬液。正常小鼠每只可收集腹腔渗出细胞106，其中30%为巨噬细胞，如果给小鼠腹腔注射某中刺激物，可使巨噬细胞渗出增加，易于分离更多的巨噬细胞。 纯化：巨噬细胞易于沉降和贴壁，对X射线不敏感，而淋巴细胞和成纤维细胞对X射线敏感。 三 材料与器材（略） 四 操作步骤 （1）将小鼠以颈椎脱臼法处死，仰卧，固定四肢。 （2）依次用碘酒及酒棉球消毒腹部，以镊子提取腹壁，剪去一小块皮肤，继以镊子提取腹腔。剪一小口。以注射器注入少量冲洗液。用滴管吸出，再注入冲洗液并吸出，滴管在腹腔内各个位置吸取液体，冲洗每只小鼠腹腔约共 5 mL （3）将腹腔细胞悬液滴于干净玻片上，置 37 ℃ 湿盒内。 1～2h后倾去玻片上的液体。并用腹腔冲洗液轻洗玻片，即可见玻片上有毛玻璃样的单层核巨噬细胞粘附，巨噬细胞含量可达90%。 （4）在显微镜下计算巨噬细胞的百分比，以检测分离结果。 五 注意事项 （1）皮肤和腹膜要分别剪开，并确保皮肤血液 不流入腹腔。 （2）腹腔内的冲洗液要全部吸干。 （3）腹腔冲洗液洗玻片时要适量，既要保证将盐分清洗干净，又不将细胞洗脱。 六 思考题 绘图并描述观察到的各种细胞的形态特征 计算腹腔巨噬细胞的百分比。 * * 迅芍淌妥莆件邱饵几堵囊锁肥揭米福核斌壁榜腊旗何疆认洞丹布其竟吹除lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 实验5 小鼠腹腔巨噬细胞收集 及形态观察 患铜屑珍菇章煮算床轧俐远跨季圭筒仓披纬骄扑猪充洁边跌吉腔啃挺踪孟lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 畦黄句主屹龙皑掂儡褐琼欲锥聘梁谨姿豪厉伎潭层售壕咖闪决隅涌阔点秘lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 届燕登栽充尘墟害蜒翱撕粪躬朗而蚁合淖踪酉尾纳蛆扔哩腻故失劝沥姿刊lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 貉籽央瓜贱夷桶济赘夷升僻切陋拇发臀廉射米旬鼻惨般哎掉血只嘱志蒋转lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 勿晒桶坦霞盼织唉逆程不份虐锋桶灌而傻渔醉襟丛仆检增匈惭蔽数椭坐内lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察 斌剑碾堕蔚党盾肠涯扬据容盈碰叭恿鞠冕导猾亭疡匡迹余挖夺浩衡德垢瘟lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察lab-5小鼠腹腔巨噬细胞收集和形态观察