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小鼠褪黑素 (melatonin)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本篇文章由专业生化试剂供应商上海岚兴生物为您提供。 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，组织及 相关液体样本中褪黑素(melatonin)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠褪黑素 (melatonin)水平。用纯化的 小鼠褪黑素 (melatonin) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加 入褪黑素 (melatonin)，再与HRP 标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合 物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作 用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的褪黑素 (melatonin)呈正相关。用酶标仪 在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠褪黑素 (melatonin) 浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片 （48） 2片 （96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：54ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A 液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B 液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20 倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中 如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细 胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存 备