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盐度胁迫下三疣梭子蟹热休克蛋白hsp90a 的原核表达 - 水产学报
第36 卷第5 期 水 产 学 报 Vol.36, No.5
2012 年5 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA May, 2012
文章编号: 1000-0615(2012)05-0681-05 DOI:10.3724/SP.J.1231.2012.27696
盐度胁迫下三疣梭子蟹热休克蛋白 HSP90a 的原核表达
1 1, 2, 3, 4*
覃 烨 , 许强华
(1. 上海海洋大学海洋科学学院, 上海 201306;
2. 上海海洋大学大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室, 上海 201306;
3. 上海海洋大学农业部大洋渔业资源环境科学观测实验站, 上海 201306;
4. 上海海洋大学国家远洋渔业工程技术研究中心, 上海 201306)
摘要: 为证明三疣梭子蟹HSP90a 蛋白与盐度胁迫的相关性, 实验根据GenBank 上提供的三疣
梭子蟹 HSP90a 基因蛋白编码区序列, 构建 pET28-HSP90a 原核表达重组质粒在大肠杆菌
DE3(BL21) 中进行的盐度胁迫表达。结果显示, 转重组质粒的大肠杆菌生存率明显高于转空载
体的大肠杆菌, 越接近大肠杆菌盐度耐受极限值, 两者差异越显著, 在盐度胁迫最高值(1 050
mmol/L)下, 两者差异达到10.7 倍，说明在盐度胁迫下三疣梭子蟹HSP90a 对大肠杆菌有保护
作用, 能显著提高大肠杆菌对盐度胁迫的耐受力。由此推测, HSP90a 蛋白可能参与了三疣梭
子蟹盐度适应的生理过程。
关键词: 三疣梭子蟹; HSP90a; 原核表达; 盐度胁迫
中图分类号: Q 786; S 917.4 文 献标志码: A
三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)作为我国 在肝胰腺、鳃和卵巢中低表达, 这一结果跟斑马鱼
沿海的重要经济蟹类, 属于广盐性水生物种,盐度 (Danio rerio)HSP90 研究结果一致, 斑马鱼的
适应范围为 10~35, 最适盐度为25~30 [1] ,整个生活 HSP90b 在发育的骨骼肌中特异表达, 由此推测, 三
史都受到外界环境中盐度的影响。三疣梭子蟹的盐 疣梭子蟹 HSP90b 主要与肌肉生长过程相关。该项
度适应性涉及到个体、组织到分子水平上的一系列 研究还揭示, 盐度胁迫条件下, 三疣梭子蟹鳃的
适应, 而分子水平上的渗透调节机制是控制其盐 HSP90a mRNA 的表达水平高于 HSP90b[5], 推测
度适应性的根本因素。 HSP90a 蛋白在维持体内稳态, 提高细胞耐受力上
热休克蛋白(heat shock proteins, HSPs), 也称应 的作用明显。
激蛋白, 是一组在生物进化过程中高度保守的蛋白 为进一步揭示三疣梭子蟹HSP90a 蛋白与环境
质分子家族。凡是能对细胞造成损害的各种因素都 盐度适应的相关性, 本实验根据GenBank 上提供的
[2]
能引起热休克蛋白表达量发生变化, 例如热胁迫 。 三疣梭子蟹 HSP90a
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