HPLC法测定正糖胶囊中大黄素含量.docVIP

HPLC法测定正糖胶囊中大黄素含量【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定正糖胶囊中大黄素的含量，以控制该制剂的质量。方法 采用大连依利特(C18,250 mm×4．6 mm，5 μm)柱分离虎杖、何首乌中大黄素，以甲醇-0．1%磷酸溶液(85?∶?15)为流动相；流速为：1 ml/min，检测波长为254 nm。结果 线性范围为0．054~0．27 μg。2,3,5,4/-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的平均回收率为99．45%，RSD=1．20%。结论 试验方法简便易行，测定结果准确、可靠，重现性好。? 【关键词】正糖胶囊；大黄素； HPLC ?? Determination of Emodin in Zhengtang Capsules by HPLC YIN Ning-ning,LIN Lin,LIN Yong-qiang. ? 【Abstract】 Objective To determine the content of emodin in Duqiang Tongluo Vinum by HPLC.Methods Amethod was established by HPLC on C18 column，with methanol-0．1 Phosphoric Acid(85?∶?15)as a mobile phase.The flow rate was 1 ml/min,and the detection wavelength was 254 nm.ResultsThe line range of emodin was 0．054-0．27 μg.The average recoveryrate was 99．45%，and the RSD was 1．20%.Conclusion The method was simple and rapid，the results are accurate and reproducible.? 【Key words】Zhengtang Capsules;Emodin；HPLC 正糖胶囊是由地骨皮、地黄、熟地黄、天花粉、虎杖、麦冬、玉竹、女贞子、何首乌、黄芪等十七味药组成，具有滋阴降糖的作用。处方中地骨皮、地黄、熟地黄、天花粉等目前没有可测定成分；女贞子含齐墩果酸、山茱萸中含有熊果酸，皆不溶于水，故样品中含量很少；黄芪中含有黄芪甲苷，但由于杂质干扰严重未能检出。处方中何首乌、虎杖都含有蒽醌类化合物，故以处方中主要药味何首乌、虎杖为指标，对其所含的有效成分大黄素的含量进行测定。供试品色谱峰分离效果好，阴性对照无干扰，可用于有效控制制剂的质量。? 1 仪器与试药? 仪器：Waters 515-717-2487高效液相色谱仪。? 试药：大黄素对照品(批号756-200211，供含量测定用，中国药品生物制品检定所)；甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。? 2 方法与结果? 2．1 色谱条件 色谱柱：大连依利特(C18,250 mm×4．6 mm，5μm)；流动相：甲醇-0．1%磷酸溶液(85∶15)；流速：1 ml/min；检测波长：254 nm。柱温：35℃。理论板数按大黄素峰计算，应不低于3000。? 2．2 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品6．75 mg，置50 ml量瓶中，加无水乙醇-醋酸乙酯(2?∶?1)混合溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5 ml，置25 ml量瓶中，加无水乙醇-醋酸乙酯(2?∶?1)混合溶液稀释至刻度，摇匀(每1 ml含大黄素27 μg的溶液)，即得。? 2．3 供试品溶液的制备[1]取本品内容物约8 g，精密称定，精密加甲醇100 ml，称定重量，置水浴上加热回流2 h，冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液50 ml，蒸干，残渣加盐酸溶液(1 ml→10 ml)25 ml，超声处理5 min使溶解，再加三氯甲烷25 ml，置水浴上加热回流30 min，立即冷却，转移至分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸水层加三氯甲烷振摇提取2次，每次25 ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇-醋酸乙酯(2?∶?1)混合溶液使溶解，转移至50 ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。? 2．4 专属性试验 按样品制备方法，制备不含何首乌、虎杖的阴性样品，照“2．3”项下操作，制得阴性样品溶液。进样10 μl，按以上色谱条件测定，结果阴性对照无干扰。? 2．5 线性关系的考察 精密吸取2．2项下对照品溶液2、4、6、8、10 μl，分别注入高效液相色谱仪，测其峰面积积分值，计算回归方程。回归方程：Y=106 288X-15 4