CD133阳性肝癌细胞的干性鉴定及体内放射免疫靶向研究 - tumor - 肿瘤.PDF

310 　　肿瘤2014 年4 月第34 卷第4 期　TUM OR Vol. 34, April 2014 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2014.04.003 Copyright© 2014 by TUM OR Basic Research 基础研究 · CD133阳性肝癌细胞的干性鉴定及体内放射免疫靶向研究 段丽群，陈兴月，侯研利，唐　敏，康强强，舒　锦，李少林 重庆医科大学基础医学院放射医学教研室，重庆　400016 [摘要]　目的：鉴定CD133 ＋ 131 131 -HepG2 肝癌细胞的干细胞特性，然后通过 I 标记CD133 单克隆抗体 （ I-CD133 抗体），研究其在人肝癌HepG2 细胞裸鼠模型体内的生物学分布及对移植肿瘤的放射免疫靶向性。方法：采用免 疫磁珠法分选出人肝癌CD133 ＋-HepG2 细胞，应用FCM 法检测其CD133 表达率，然后应用体外成球、克隆 形成及体内成瘤实验鉴定其干细胞特性；采用氯胺T 法制备131I-CD133 抗体，并鉴定其标记率、放化纯度、稳 定性及细胞结合活性；建立HepG2 肝癌裸鼠模型，向模型鼠尾静脉注射131I-CD133 抗体，2 、12 、24 和48 h 时 131 测量并计算模型鼠体内各组织器官的每克组织百分注射剂量率；同时采用同型 I-IgG 作为对照，比较24 h 时 2 种标记物在HepG2 肝癌裸鼠模型体内的各组织生物分布及肿瘤/ 非肿瘤组织比值。结果：成功分选出人肝癌 CD133 ＋-HepG2 细胞，其CD133 表达率为 （93.58 ±3.74 ）% ，并具有很强的体外成球、克隆形成及体内成瘤能 131 131 力。 I-CD133 抗体的标记率为 （86.95 ±1.16 ）% ，放化纯度为98.07% ；与血清孵育48 h 后， I-CD133 抗体的 131 ＋ 放化纯度仍为 （89.63 ±0.64 ）% ； I-CD133 抗体与CD133 -HepG2 细胞的结合率最高可达 （69.30 ±0.69 ）% 。 131I-CD133 抗体注入HepG2 肝癌裸鼠模型后，随着时间延长，包括肿瘤在内各组织器官的每克组织百分注射剂量 131 131 率均降低；与 I-IgG 对照组相比， I-CD133 抗体组在24 h 时的肿瘤放射性摄取量以及肿瘤/ 非肿瘤组织 （除 血液和胃）比值明显增加 （ 131 ＋ P ＜0.05 ）。结论： I-CD133 抗体在裸鼠体内能有效结合CD133 肝癌细胞，从而聚 集在肿瘤组织中。推测CD133 有可能成为肝癌治疗的新靶点。 [关键词]　癌，肝细胞；肿瘤干细胞；碘放射性核素；组织分布；放射免疫测定；CD133 [中图分类号]　R735.7 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2014) 04-0310-08 Characterizatio