液相实验室操作要点和注意事项.docVIP

液相实验室操作要点及注意事项 液相色谱仪应置于稳定的工作台上，避免震动、阳光直射和气流。环境温度为10-30℃(应恒定)，相对湿度25%-75%。电源电压220±20V。应保持仪器放置房间的清洁、卫生，每天打扫房间、擦洗操作台和仪器外壁。 流动相使用前必须经过0.45μm的滤膜，有机相的流动相必须为色谱纯，水相必须为新鲜制备的纯化水，并规定使用有效期，以防止长菌或长藻类。 Agilent HPLC色谱仪用于清洗用的10%异丙醇每15天更换一次，Waters HPLC色谱仪用于清洗密封垫和进样针的10%甲醇每15天更换一次。 色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。 对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。 AgilentHPLC色谱仪每3个月或当玻璃滤头发黑时，用30%硝酸浸泡玻璃滤头30min(禁止超声) ， WatersHPLC色谱仪每3个月用纯化水超声金属滤头30min。 Agilent HPLC色谱仪使用5ml/min的流速排气时，如果压力大于10bar，更换过滤用白色滤头; Waters HPLC色谱仪应定期（说明）清洗在线过滤器。 紫外检测器的氘灯有一定的寿命，进样前一小时左右打开即可。实验完成冲洗柱子时即关闭以延长使用时间。每3个月用色谱纯的异丙醇（或甲醇）冲洗检测池。 仪器如较长时间不用应使高效液相色谱仪处于所有电源开启、检测器紫外灯关闭的待机状态，不能频繁的开启/关闭电源。 发现泵漏液、紫外灯能量不足或损坏、仪器无法启动等等较严重的情况，应报告室主任，室主任安排进行检查，维修，并做好记录。 进入计算机上的色谱工作站应设置密码。如工作站上不能设置密码，则应在装有该色谱工作站的计算机上设置密码，防止未经许可授权的人员进入该工作站系统。 应设置计算机屏幕保护的密码，间隔时间不大于15分钟，防止在操作者离开计算机较长一段时间时，其他人员进入工作站。所有的密码应由室主任做统计并报上级领导备案。 操作人员应正确运用工作站，不得对计算机系统时间等基础信息进行改动，保证采集到的数据原始真实、完整规范。 可根据需要选择工作站提供的图谱打印格式打印图谱，但必须保证图谱所有信息的完整性，不得对页眉、页脚的内容进行删减。 色谱图的图谱号必须保证唯一性；样品命名必须细致详尽。每张图谱上应记录检验人和复核人以及时间。 电脑中的检验原始图谱每半年至少备份一次，用硬盘或光盘归档保存。所得数据硬盘或光盘由QC按检验记录的管理规定中相关规定进行保存。 个人实验台面及使用的试剂等都应做好标识，以防混淆，以便偏差的调查。 数据应在第一时间记录，保证真实可靠。 氯仿,四氯化碳,甲醇以及苯等高危溶剂,或者盐酸等强刺激性气体使用时候注意排气通风。 硫酸,硝酸等氧化性酸,注意使用安全,如果不小心滴在身上,应立即使用水清洗,然后用碳酸氢钠液洗涤,不要因为浓度很低而忽视,因为随着水份的蒸发,硫酸的浓度增高,而会使得原来的稀硫酸同样变成浓硫酸。 所有有机的废液都要放入废液缸,禁止倒入下水道,造成环境污染.所有的高浓度无机废液,包括酸碱以及所有的有毒废液,比如砷试剂都严禁倒入下水道。 使用量筒、移液管、滴定管移取一定液体，在读数时，应该使视线刻度与液体凹面最低点的切线处于同一平面上。 C18色谱柱在使用完后，应先用水相（10%甲醇）冲洗较长时间（约1h），再使用有机相（90%甲醇）冲洗30min后密封保存。其他类型的色谱柱应按相应的要求冲洗，保存。 色谱仪在使用完后，应用大量水相冲洗管路，以防止系统残留的缓冲盐等析出，堵塞管路。 色谱柱安装时应尽量减少死体积，以免影响分离效果。 自动进样器的针座应定期拆下清洗，避免影响下一次试验。 色谱仪应防止流动相抽干。泵需设定压力上限（15-20Mpa）和压力下限（0.5-1Mpa），若不小心抽干应使用过滤脱气后的甲醇冲洗，以排去系统中的气体。 在切换使用含缓冲盐的流动相时，为防止盐类析出，应先用水相（10%甲醇）过渡。 流速升高或降低时，应逐步完成。 容量瓶等应认真清洗，根据使用的样品类型，选择相应的清洗试剂，放置在相应的位置，以免混淆。 实验室内的电器应定期检查，防止漏电等事故。 保证电子天平的使用环境符合相应的要求：电子天平工作条件:温度15~25℃， 相对湿度 75%，电源电压220±20V。 本仪器应在正常的照明、室温和湿度条件下使用，防止在高温高湿的条件下使用，避免经常接触腐蚀性气体，否则将影响使用寿命，承放本仪器的基座或工作台应牢固稳定，并基本水平。 电子天平在每次接通电源后应预热三十分钟后方可开启显示器进行称量。使用前应调节天平水平钮,使天平水泡位于水平仪中心。 做好天平内、外部卫生保养工作，每次称