脱盐柱操作手册.PDFVIP

脱盐柱操作手册 简介 1 C18脱盐纯化柱 2 RPC脱盐纯化柱 7 G25脱盐纯化柱 12 订购信息 版本号：BM001-1 简介 目的 Oligos合成结束后，完整的oligo链在碱性溶液的作用下从固相支持物中解离下来。解 离下来的溶液中既包含了完整的所需寡核苷酸，同时也包含了在合成过程中失败的DNA链 （错误序列）和盐分。错误序列的数量取决于合成效率。在许多实验如PCR中，这些错误 的序列会与正确的全长产物竞争，因此在使用之前需要将其去除以提高下游应用的成功率。 引物纯化的方式 C18脱盐纯化柱：通过疏水作用进行物质的脱盐纯化。C18脱盐柱适合于40 mer及以下的 oligos样本的脱盐纯化。可去除不带DMT的失败序列及盐分。纯化后的oligos适用于 PCR、测序等。 RPC脱盐纯化柱：通过疏水作用进行物质的脱盐纯化。RPC脱盐柱适合于40 mer及以下的 oligos 样本的脱盐纯化。可去除不带DMT的失败序列及盐分。RPC脱盐纯化柱的稳定性更 强，克服了C18脱盐纯化柱pH值适用范围狭窄的限制。纯化后的oligos适用于PCR、测序 等。 G-25脱盐纯化柱：根据分子的大小进行物质分离，达到oligos分离纯化的目的。G-25脱 盐纯化柱可以从25 mer~50 mer中去除失败的序列（更小的片段）。纯化后的oligos适用 于PCR、测序及克隆等。 适用范围 适用于合成后的寡核苷酸的粗产品的脱盐纯化，去除失败的DNA链及操作过程中的盐分。 同时利用脱盐柱也可以对PAGE、HPLC纯化后的寡核苷酸进行脱盐处理。 1 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。 版本号：BP001-1 C18脱盐纯化柱 C18脱盐纯化柱以硅胶基质的C18为填料，其官能团十八烷基具有很强的疏水性，对非 极性化合物具有出色的强保留特性。C18脱盐纯化柱可以吸附带DMT的DNA分子，对盐分 没有任何保留，因而可获得高纯度的DNA产物。 选择指南 逗点生物提供不同规格的C18脱盐纯化柱，可依据oligos的浓度选择合适规格的脱盐柱。 如果进行批量处理，可选择96孔板进行脱盐纯化。 货号 规格 适用oligos规格 参考步骤 DC18150 50mg/ 1mL 10nmol-200nmol 操作步骤四 DC183100 100mg/ 3mL 10nmol-600nmol 操作步骤一 DC183300 300mg/ 3mL 10nmol-2.0µmol 操作步骤二 DC1861000 1g/ 6mL 1.0µmol-6.0µmol 操作步骤三 DC189650 50mg/ 96孔板 10nmol-200nmol 操作步骤四 注：C18脱盐纯化柱还可以对粗产物及HPLC、PAGE纯化后的oligos进行脱盐处理，具体 操作步骤见步骤五。 试剂 0.1 M TEAA，pH 0.5 M 洗涤液（5%乙腈，溶于0.5 M NaCl） 3%三氟乙酸（ 20 TE缓冲液：10 mmol/ L Tris-Cl，1 mmol/ L EDTA ，pH 8.0 2 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。 操作步骤一 样品的准备 向寡核苷酸样本中加入0.5 M NaCl至体积为2 mL。 脱盐柱的活化 活化：1 mL