人白细胞介素-8(IL-8)试剂盒使用方法.docVIP

人白细胞介素-8（IL-8）试剂盒使用实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定中水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入，经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 试剂盒组成 标准酶板稀释液稀释液-20℃保存，但应避免反复冻融操作步骤 μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 600 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 300 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 150 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 75 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻混匀分钟甩干μl，空白孔除外。 μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应。450nm波长依序测量各孔的度（OD值）计算以标准物的浓度