茶毛虫黑卵蜂产卵刺激素的研究.pdf

强㈠ 7。 第 22卷第 4期 湖 南 农 业 大 学 学 报 Vot．22No．4 1996年 8月 JournalofHunanAgricu[turalUniversily Aug． 1096 茶毛虫黑卵蜂产卵刺激素的研究 67．f牟一．‘ 堕壁盟 堡兰二陈常铭! (1湘南化T研究院农药研究所 ，长沙-410007／ g~．7g·； A ‘湘南农业大学植物保护系长沙。 【摘 要】 采用改进的培养皿法制成人工 寄主卵．研究丁茶毛虫黑卵蜂对产卵刺激素的行为反 应．结果表明一不论人工寄主卵内测试液是水还是寄主卵浆液t只要卵表 涂有识主利它素 (卵块抽 提物lt黑卵蜂就对其进行检查和刺探．但是，只有当测试液为 寄主卵浆 液时才会表现 出持续长时 间的产卵反应，这说 明寄主卵浆液中含有刺激雌蜂产卵的产卵刺激素．经对产卵刺激素的分离、纯 化和鉴定，产卵刺激素含有多种成分，由12种蛋 白质组分 、3种糖和 1j种游离氨基酸组成． 关【键词】璺 ．{坠堂；￡豳歪墨皇墨目蛙：=兰 型墼蓥 【中图分类号】 Q 547．405 寄生蜂如何识别寄主并在其 内产卵的问题一直受到国内外学者的极大关注．很多研究业 已证实 ，寄生蜂在寻找、识别寄主以及最后产卵于寄主之中等一系列行为都与某些信息化合物 的存在有关 。]．人们司以利用某些信息化合物引诱相应的寄生蜂在非 自然寄主中产卵．就卵 寄生蜂而言．除了对赤眼蜂作过较多研究外 ]，有关黑卵蜂产卵刺激素的研究报道甚少 ． 茶毛虫黑卵蜂TelenomuseuproctidisWilcox属于膜翅 目细蜂总科缘腹细蜂科，是茶园中茶 毛虫 (EuproctispseudoconspvrsaStrand)卵期的优势寄生蜂，其在控制害虫种群增长、防治害虫 于产卵期方面起着极为重要的作用 ]．笔者口在进行该蜂识主利它素的研究 中曾发现，寄主卵 内存在着一种刺激茶毛虫黑卵蜂产卵的化学物质即产卵刺激素．本文报道了茶毛虫产卵刺激 素的生物活性测定，及其分离、纯化和鉴定的初步结果 1 材料与方法 11 供试虫源 供试蜂种从湖南省长沙县长桥茶场采得的茶毛虫越冬卵块羽化而来．室 内用寄主卵扩大 繁殖．选羽化后 24~48h经群体交配和喂食 10 蜂蜜液的雌蜂供生物活性测定试验用． 12 生物活性测定 采用改进的培养皿法制成人工寄主卵进行生物活性测定．将培养皿 (直径 6cm)倒放，在 底 平面上融上一层石蜡一凡士林 (直径约2cm)．用解剖针在其上压10个半球形 凹窝 (直径 1mm)．将测试液用微量注射器注入凹窝内(约 10gL)，再覆 以一层薄膜 (聚乙烯薄膜)或擦镜 纸(聚乙烯薄膜或擦镜纸对寄生蜂的产卵效应较好)这样就制成 了一种薄膜人工卵卡 膜外滴 本研究系国家 自然科学基金资助项 目．第一怍者欧硗明 31岁 ．助理研究员 收稿 日期 1996—03—08 湖 南 农 业 大 学 学 报 1996年 8月 加识主利它素 (卵块抽提液约 10I』L)，待溶剂挥发至干后，用另一培养皿 (直径 4．5cm)盖住， 随后引人一头雌蜂，在 日本 Olympus体视显微镜下观察和记录黑卵蜂的行为反应情况．记录 方式和标准如下：当雌蜂遇到人工寄主卵时并不表现出触角敲打，仅稍停后即离开 ，记为排斥 (无反应)}爬上卵并用触角敲打检查，但不表现出产卵管钻刺行为．记 为检查；伸出产卵管．作 产卵动作 ，但 时间较短 (小于 5s)，记为刺探 ：表现 出较长时间 (多于 15s)的钻刺 ，并产卵于其 中，记为接受反应． 1．3 产卵刺激素的收集、分离、纯化与鉴定 1．3．1 收集与制备 取茶毛虫雌蛾剖馥卵(约 ．0g)放人离心管 (7．5cm×1．5em)中，将卵内含物挤压 出，离 心 10min(2400r／rain)，用注射器吸出淡黄色的卵液 ，再用蒸馏水洗涤离心管．合并洗液和卵 液．离心后得 5mL卵浆液