胃癌患者外周血CD4+CD25+CD127lo--调节性T细胞表达及意义.docVIP

胃癌患者外周血CD4+CD25+CD127lo/-调节性T细胞表达及意义【摘要】目的：探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-调节性T细胞(regulatory T cells，Treg)的表达及意义。方法：采用流式细胞术检测26例胃癌患者、30例胃溃疡患者和20例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes，CTL)和NK细胞，采用ELISA法检测血清中γ-干扰素(interferon γ，IFN-γ)的表达水平。结果：胃癌患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比为(6.12±2.08)%，高于胃溃疡患者和健康志愿者(P均0.05）。 2.2 手术前后胃癌患者CD4+CD25+CD127lo/-Treg 、CTL、NK细胞和IFN-γ的表达：见表2。 3 讨论 大多数CD4+细胞属于Thl或者Th2亚群，而有5％左右不属于两者中任何一个，称为CD4+CD25+Treg。CD4+CD25+Treg具有下列特征：（1）具有低反应性和免疫抑制性两大特点，在体外很难扩增和繁殖，能够抑制CD4+和CD8+T细胞的活化与增殖；（2）它的活化是抗原特异性，但可非特异性抑制同种抗原，可以抑制对自身抗原或外来抗原的异常免疫反应；（3）活化以后分泌大量IL-10和TGF-β，抑制Thl介导的免疫和炎症、Th2介导的抗体产生以及CD8+CTL的活性。 人Treg表型非常复杂，现在公认表达核转录因子Foxp3，但由于其表达在细胞内，检测时需要先固定破膜，不能分选活细胞做后续功能抑制实验，无法证实其免疫活性，所以一般用CD4+CD25high代表Treg[2]。但这种检测方法存在一个明显的缺点，CD25high的荧光强度设门各个实验室非常随意，没有一个明确的标准。最近研究发现，在新鲜分离的正常人外周血T细胞中CD127和Foxp3表达呈负相关，87%的CD25+CD127lo/-Treg高表达FOXP3，自身活化的效应T细胞高表达CD127，因而可用CD127区分这两种细胞，现今认为CD4+CD25+CD127lo/-是天然产生Treg细胞最好的细胞膜标志[1，3]。本研究中健康志愿者外周血CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+T淋巴细胞为（4.78±1.31）%，比之前很多研究人员用CD4和CD25标记检测的Treg略高[4]，可能是改进了CD25的设门方法。在小鼠动物试验中，去除Treg能够提高小鼠对多种不同来源肿瘤细胞的免疫排斥作用，提示Treg能够抑制抗肿瘤免疫反应。同时在临床研究中发现，多种不同来源的肿瘤患者存在数量过多的Treg细胞，且跟其肿瘤进展相关[5]。本研究显示，胃癌患者外周血中的CD4+CD25+CD127lo/-Treg高于胃溃疡患者和健康志愿者，手术后患者CD4+CD25+CD127lo/-Treg的数量明显下降，提示肿瘤负荷与胃癌患者体内CD4+CD25+CD127lo/-Treg的数量有关。现今认为，肿瘤相关抗原能诱导Treg富集于肿瘤及其周围淋巴结，导致平衡向有利于自身耐受的方向发展，其确切关系尚未完全明了。 众所周知，CTL和NK细胞是体内两种主要的肿瘤杀伤作用细胞，产生IFN-γ等细胞因子杀伤肿瘤突变细胞。CD4+CD25+CD127lo/-Treg能抑制CTL细胞和NK细胞的表达和活性。本研究发现，胃癌患者体内的CTL、NK细胞及IFN-γ均低于正常，与CD4+CD25+CD127lo/-Treg呈负相关。手术后除CTL无明显改变外，NK细胞和血清中IFN-γ含量均增多。推测Treg可能通过以下方式抑制CTL和NK细胞，其一是释放抑制性细胞因子TGF-β1抑制两种细胞的溶细胞活性[6]，其次是抑制两种细胞具有杀伤的细胞因子的释放，主要是IFN-γ等。 参考文献： [1] Liu W，Putnam AL，Xu-Yu Z，et al.CD127 expression inversely cor-relates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ T reg cells[J]. J Exp Med，2006，203(7):1701. [2] 徐静玮，李向培，李 庆，等.调节性T细胞亚群变化与五种自身免疫性疾病的关系[J].中华医学检验杂志，2006，29（3）：245. [3] Seddiki N，Santner-Nanan B，Martinson J，et al. Expression of inter-leukin (IL)-2 and