越桔组织培养和杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗生理效应研究.docVIP

越桔的组织培养及杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗的生理效应研究 HYPERLINK /Search.aspx?q=author:陈爱美陈爱美 【摘要】：越桔属(Vaccinium)植物分布广泛，从热带一直到北极圈都有，在我国集中分布于西南几省。越桔(Vacciniaceae)是一种果药兼用的植物，含有大量对人类健康有益的物质，包括：抗氧化物，鞣酸，叶酸，抗菌成分，丰富的食用纤维等。越桔喜生于微酸性土壤中，有些为酸性土壤指示植物。我国土壤中酸性土面积大而种类多，酸性土总面积在2亿hm~2以上。除去砖红壤和赤红壤等不适宜发展的地区以外，适栽土壤区域不少于1亿hm~2。由于许多作物对酸性土壤的适应局限性，这些区域大多数在经济上比较贫困落后，开发的潜力相当大。 组织培养技术可以在短期内生产出大量的优质苗木，而试管苗成本高低是商品化育苗工厂的决定因素，降低试管苗成本是提高工厂化育苗经济效益的关键途径。而组培苗驯化成活率低，成活后移栽到田间生长势弱。越桔根系呈纤维状，没有根毛，但在自然状态下，越桔根系与菌根真菌共生形成杜鹃类菌根(Ericoid mycorrhiza．EM)。EM在促进植物生长、提高养分吸收率、生态系统养分循环及保护植物抵御不良环境胁迫中起关键作用。 本论文从越桔组织培养的应用研究出发，以兔眼越桔(Vaccinium ashei Reade)栽培品种园蓝(Garden blue)为主要试材，针对越桔在组织培养中使用的玉米素价格昂贵，用量大，组培苗驯化成活率低等问题。用价格比较低廉，分裂素活性比较强的TDZ宋代替ZT，对培养基进行了简化研究。并从缙云山上十年生以上的越桔属植物乌饭树(Vaccinium.sprengelii Sleumer)根系上分离菌根真菌，对越桔组培苗进行了接种，研究杜鹃类菌根(EM)对组培苗的生理效应。 一、影响兔眼越桔初代培养的因素研究 试验结果表明：在初代培养中，用0.1％的升汞消毒外植体6～8min最为适宜。兔眼越桔 西南农业人学硕l学位论文 摘要 春季取材腋芽的诱导率都比秋季取材的高，而且诱导出的芽长势也较好。春秋季萌生出的根 状装的萌芽率比钱尖和茎段的萌芽率高，诱导培养基改良wPM附加5.omg·L一’玉米素明显 提高了芽的一秀导率，并且所诱导出的腋芽长势较强‘ 影响兔眼越桔继代培养的因素研究 在继代培养中，我们对影响增殖系数的基本培养基种类，激素种类及浓度，琼脂用量， 蔗糖用量，pH值和继代周期进行了研究。结果表明:改良wpM培养基显著促进了越桔组培 苗的增殖。激素是影响增殖的关键因子，我们以改良WPM培养基为基本培养基，对激素ZT、 TDZ、GA3、6一BA同时进行了筛选，试验结果表明:TOZ对增殖系数的影响极显著优于ZT、 GA;、‘BA，平均增殖系数可达到7。改良wPM培养基附加Tozo:mg·L-’+GA31.omg·L一， +I AAO.2 mg·L一’为增殖培养基的最优组合。不同的蔗糖处理对增殖系数的影响差异不显著， 最优增殖培养基附加蔗糖209·u’的处理其平均增殖系数略大些，在生长中的表现也比较好。 不同琼脂用量对增殖系数的影响也没有显著差异，但培养基中附加7g·t-l琼脂，组培苗的 平均增殖系数最大。pH值对增殖系数的影响差异显著，其中以pH值5.5的处理影响最显著， 这与越桔的喜酸特性是相吻合的。不同继代周期对增殖系数的影响差异极其显著，以4周为 一个继代周期，其增殖系数最高，周期也比较短，转接时组培苗的生长势还比较强，若周期 太长，培养基会板结开裂，成本也会升高。 影响兔眼越桔叶片不定芽诱导率的因素研究 我们对无菌苗的叶片进行了诱导培养，以改良WPM为基本培养基，试验结果表明:暗 处理对叶片不定芽的诱导率存在显著差异，其中暗处理20天叶片不定芽的诱导率最高。TDZ 0.05mg’u’可诱导出大量的叶片不定芽，并且不经愈伤阶段，不定芽直接从叶片上分化出。 四、兔眼越桔培养基简化的研究 分别用白砂糖、自来水、琼脂条代替蔗糖、蒸馏水、琼脂粉，对培养基进行了简化研究， 试验结果表明:几种简化培养基对增殖系数的影啊差异不显著，其中以简化培养基改良 wPM+白砂糖209·L一’+琼脂条8g·L一’+自来水效果最好。 五:兔眼越桔组培苗的生根研究 由于木本植物组培苗生根比较困难，我们同时采用瓶内生根和瓶外生根两种方法，对越 桔组培苗进行诱导生根，试验结果表明:1/2改良wPM+NAAO.5 mg·L一，的处理生根率最 高，可达68.98%，遮光处理20天可明显提高组培苗的瓶内生根率，生根率可高达82、18%。 激素速蘸处理以NAA 1 000 mg·L一’可使瓶外扦插苗生根，但生根率只有17.95%。生根苗基 部基本没有愈伤出现，较瓶内生根苗的须根略粗，颜色嫩白，根数较多。 西南农业人