SA检测猪呼吸与繁殖综合征病毒抗体研究.PDFVIP

维普资讯 一 19一 零栏祥人主持胡目-竞I| 中国动物检疫 2006年第23卷第8期 文章编号：1005—944X(2006)08—0019—04 争ELISA检测猪呼吸与 繁殖综合征病毒抗体研究 孙淑芳 ’)包振民 郭福生 ’)郑增忍 ’)蒋正军’)王 娟 ’)李 葳 (中国海洋大学生命科学院 266003) 摘要：应用抗PRRSN蛋的单克隆抗体建立了竞争ELISA检测技术，与美国IDEXX公司的间接 ELISA检 测试剂盒对比检测了 30份SPF猪血清．29头SPF猪人工接种呼吸与繁殖综合征病毒后于5d、12d、29d采集的 猪血清共87份．临床血清95份，以及其他相关病毒的阳性血清。实验证明，竞争ELISA的检测阴阳性限值为 30％．检测特异性为 100％，在人工攻PRRSV病毒第五天的猪血清中，可检测到抗PRRSV N蛋 白抗体，12dpi， 阳性检出率为93％，29dpi，阳性检出率为 100％，与 IDEXX PRRSVELISA试剂盒进行比对，结果表明，二种检 测方法检测美洲株 PRRSV抗体的符合率为90％vX上，但检测欧洲株抗体符合率较低。建立的竞争ELISA检测 技术对于PRRSV美洲株抗体的早期诊断有非常重要的意义。 关键词：猪呼吸与繁殖综合征(PRRS)；竞争ELISA；敏感性；特异性 猪繁殖与呼吸综合征 fPRRS1 实验证 明，感染 PRRSV后 (约 7d1首 1．3 临床血清 95份 上海奉贤兽 是 2O世纪8O年代末 出现的一种 先产生针对该蛋 白的抗体。然后再 医站提供 新病 1987年美 国首先报道发生该 产生针对其他蛋 白的抗体8[-91。因 1．4 对照样品 生理盐水 1份 ．兔 病 ”【．我 国于 1995年首次在北京郊 此 ．N蛋 白抗体成为早期诊断的首 血清、羊血清、鸡血清各 2份，由中 区猪群发现有该病的流行[2]。其症状 先抗体 本研究的 目的是研究应用 国动物卫生与流行病学中心诊断液 主要表现为怀孕母猪流产、早产、死 单克隆抗体的竞争 ELISA检测技 研究中心制备 猪圆环病毒标准阳 胎、木乃伊胎及仔猪感染后的成活 术的敏感性、特异性，探讨其作为商 性血清 2份 ．猪瘟病毒血清2份 。来 率下降．成年猪的呼吸道症状p卅。猪 业化试剂盒的可行性 自中国农科院哈尔滨兽医研究所 ： 繁殖与呼吸综合征 目前已成为严重 1 材料 口蹄疫标准阳性血清2份、衣原体 危害我国养猪产业 的传染性疾病 1．1 阴性血清 3O份 SPF猪血清 ． 标准阳性血清 2份 ．来 自中国农科 近年来 ．国内外许多学者对 美 国10wa州立大学兽 医实验室 院兰州兽医研究所：猪乙脑标准阳 PRRS的诊断进行 了大量 的研究 (VDL)引进。 性血清2份．猪细小病毒标准阳性 [5-71 ． 国内外关于PRRS抗体诊断方 1．2 PRRSV人工攻毒猪血清 美 血清 2份 ．伪狂犬病标准阳性血清 法的报道已有很多。包括间接免疫 国 Iowa州 立 大 学 兽 医 实 验 室 2份 ．来 自华 中农大病毒室。 荧光试验、ELISA和 IPMA等 。其 中 (VDL)引进 ，3O头 SPF猪经人工进 1．5 猪呼吸与繁殖综合征抗体检 血清学诊断操作简单。且在畜群水 行呼吸与繁殖综合征病毒接种后5 测试剂盒 美 国IDEXX诊断试剂公 平上具有 良好的特异性和敏感性 天、12天、29天采集的不同时期猪 司生产。 血清共 87份 1．6 纯化基因工程表达 PRRSN 11中国动物卫生与流行病学中心 存栏数测算 。农区每 5000羊单位左 阿旗是牧业大旗．畜牧业经济 很不完备．特别是服务手段还比较 右，牧区每 10000羊单位左右 ．聘 的发展快慢对全旗经济的发展致关 落后，由于多年的投入不足．基础设 请 1名动物防疫员兼动物疫情报告 重要，而现代畜牧业的发展必须有 施设备短缺老化也比较严重 ．特别 员．全旗共设 344名村动