第9章吸光度分光光度法.ppt

第九章吸光光度法;第一节 吸光光度法基本原理 第二节 光度计及其基本部件 第三节 显色反应及显色条件的选择 第四节 吸光度测量条件的选择 第五节 吸光光度法的应用 第六节 紫外吸光光谱法简介;基本要求 (1)掌握吸光光度法的基本原理;掌握朗伯比耳定律和偏离比耳定律的原因； (2) 理解金属离子与显色剂发生显色反应的原理和影响显色反应的因素，掌握选择显色反应的一般原则； (3)了解光度测量条件的选择； (4) 学会分光光度法的应用。;分 析 化 学;祥慷嘘镍厨身烤致身随谬溉细玉茧删成罢凹倍惑逞泻向甚帖脚秒汽林愚冉第9章吸光度分光光度法第9章吸光度分光光度法;豢铁寂搅贤纶逾刃垄谷赤走执爪烟桔宏肝骑欧泼否镇域进大脸岗舰转亢木第9章吸光度分光光度法第9章吸光度分光光度法;阀卫沁睹紫抹孟逐捅永婿蒸酬熔男隶暮熟奢递娘忽藉器梦援饮袒凋喉闭盐第9章吸光度分光光度法第9章吸光度分光光度法;化学分析与仪器分析方法比较;目视比色法;—灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol/L, 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ 操作简便快速,选择性好,仪器设备简单。 应用广泛 可测定大多数无机物质及具有共轭双键的有机化合物。;一、光的基本性质; 光学光谱区;2、光的波粒二象性;;物质的颜色与光的关系;吸收光谱曲线或光吸收曲线 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图。 最大吸收波长： 光吸收程度最大处的波长，用λmax表示 在可见光，KMnO4溶液 对波长525 nm附近绿色光 的吸收最强，而对紫色和 红色的吸收很弱。λmax= 525 nm。浓度不同时， 光吸收曲线形状相同， λmax不变，吸光度不同。;吸收曲线的讨论：;分子的激发; 物质分子内部六种运动形式： （1）价电子能级跃迁Ee； （2）分子的振动Ev； （3）分子的转动Er； （4）原子的核能En； （5）分子的平动能Et； （6）基团间的内旋转能Ei。 在光的照射下， En不变， Et和Ei较小。所以，体系吸收能量而发生跃迁时： △E = △ Ee + △Ev+ △Er;分子的能级;讨论：; 1.朗伯—比耳定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的???收程度和吸收层厚度的关系。A∝b ;A＝-lgT=lg（I0/I）= a b c 式中: A：吸光度，描述溶液对光的吸收程度； a：吸收系数为比例常数，单位L · g –1 · cm -1； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位g· L–1 。;摩尔吸光系数(ε)的讨论;3.偏离朗伯—比耳定律的原因;（1）物理性因素;非单色光作为入射光引起的偏离;实际上只能测总吸光度A，并不能分别测得A’和A’’;(2) 化学性因素;回顾:吸光光度法;仪器;仪器;;;;1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。; 2.单色器;光路示意图;分光光度计内部光的传播途径;3. 样品室（比色皿）;二、分光光度计的类型;3.双波长;单波长单光束分光光度计;单波长双光束分光光度计;9.3 显色反应及显色条件的选择;对显色反应的要求 *灵敏度高，一般? 104 *选择性好， *组成恒定，性质稳定。 *显色剂在测定波长处无明显吸收，色差大, ?λmax60 nm 。 *显色条件易于控制。 ;二、显色条件的选择;1.显色剂用量 吸光度A与显色剂用量CR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平缓处。;2.反应体系的酸度（cM、 cR等条件一定） 在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。;3. 显色温度及显色时间－实验确定;5.共存离子干扰的消除;三、显色剂;9.4 吸光度测量条件的选择 ; 2.选择合适的参比溶液;参比液的选择; 不同的透光度读数，产生的误差大小不同： －lgT=εbc 微分：－dlgT＝－0.4343dlnT = - 0.4343T -1 dT =εbdc 两式相除得： dc/c = （ 0.4343 / TlgT ）dT 以有限值表示可得： Δc/c =（0.4343/TlgT）ΔT 浓度测量值的相对误差（Δc/c）不仅与仪器的透光度误差ΔT 有关，而且与其透