猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)3′末端非翻译区中调控序列的研究.pdf

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ! ’ ( 年 月 日 $%% % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,-./ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（ ） 末端 !#$ % 非翻译区中调控序列的研究 ， $ $ 孙 志 ，王金勇 ，张建武 ，秦爱健 ，袁世山 （中国农业科学院上海兽医研究所 中国动物卫生与流行病学中心上海分中心农业部动物寄生虫病重点实验室 上海 $%%$0$ ） $ 扬州大学兽医学院 扬州 ） （ $$#%%1 摘 要：以北美株GHHIJ 感染性克隆K232$ 为平台进行反向遗传操作，将0LM4H 中的一级结构进行了系列缺失或 插入突变，并改变二级结构中的一个保守的茎环结构，构建全长GHHIJ 突变体克隆，解析0LM4H 突变对病毒感染性 的影响，旨在界定调控GHHIJ 0LM4H 的启动子序列及二级结构，即复制过程中的最小调控元件。以空斑和N,/+?./@ -5,+ 来研究拯救后重组病毒的复制、转录和生长特性，发现重组病毒感染动力学与亲本病毒无可见差别。结果表明 的 端可耐受一定数目的核苷酸的缺失（ ）与插入（ ）突变，但进一步 缺失造成保守的环结 GHHIJ 0LM4H #L !@+ $0@+ 1@+ 构突变后就使病毒失去了感染性。证明了这是0LM4H 中控制GHHIJ 复制过程的的必需序列及二级结构，为进一步 解析GHHIJ 复制过程的调控元件奠定了基础。 关键词： ；反向遗传操作； 非翻译区；基因组复制； 转录 GHHIJ 0L HNO 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） P101 O %%%76$%1 $%% %#7%!7%# 猪繁殖与呼吸障碍综合征（ 道， 的转录、翻译及病毒包装的正常运转依 G,/*=@. H.K/,QB*+=R. GHHIJ ［］ 赖着 ， ），俗称“蓝耳病”，首先 0LM4H 精细有序地调节才能完成 ，但这种推 9@Q H.K=/9+,/A IA@Q/,. GHHI ［］ 发现于上世纪