甲醛炎性痛时脊髓后角HO-1蛋白表达增加对神经元凋亡影响.pdfVIP

中文摘要 甲醛炎性痛时脊髓后角Ho．1蛋白表达增加 对神经元凋亡的影响 摘 要 目的：内源性一氧化碳(Carbon 化氮(Nitricoxide，NO)后被发现的又一重要气体信号分子和 神经递质，在人和哺乳动物的生理及病理过程中具有重要的 生物学功能。血红素氧合酶(Heine 代谢的限速酶，广泛分布于人体各组织器官，其催化血红素 为HO的一种亚型，正常时在神经系统表达较低，但可被多 种因素所诱导。 本室以往研究发现，甲醛炎性痛可诱导脊髓后角NO产 生增多，进一步的研究发现，NO增加是甲醛炎性痛诱导脊 髓神经元凋亡的重要机制之一。已有一些研究发现，HO／CO 系统参与了脊髓伤害性信息的传递过程，结扎坐骨神经引起 的神经损伤可诱导脊髓水平HO蛋白表达增多，CO产生增 多，但甲醛炎性痛引起的伤害性信息传入是否会诱导脊髓 HO．1表达发生改变以及HO．1表达改变在甲醛炎性痛诱导 的神经元凋亡过程中发挥何作用尚未见相关报道。 本实验应用Western blotting方法首先观察了甲醛炎性痛 大鼠脊髓后角HO．1蛋白表达的变化，而后采用鞘内注射 HO．1抑制剂锌原卟啉IX(ZincProtoporphyrinIX，ZnpplX)，观 察HO．1对炎性痛大鼠脊髓神经元凋亡的影响，阐明HO．1 表达改变的意义。 中文摘要 1甲醛炎性痛诱导脊髓HO．1蛋白表达改变 取材。甲醛各时间点组动物均于足底注射甲醛后观察自发疼 痛反应，然后于不同时间点断头取腰5(L5)脊髓后角，用 Western blot方法分别检测左、右两侧脊髓后角HO．1蛋白的 表达。 结果发现：大鼠右后足底注射甲醛后，即刻出现舔、摇、 和抬高注射足等白发痛行为，这些自发性痛反应呈双时相 性，持续lh以上，且注射部位出现红、肿等明显的炎症反 应。 Western blot检测结果发现，Control组大鼠脊髓后角左、 右两侧的HO．1蛋白条带面积较小，染色较浅，表明正常大 鼠HO．1蛋白有一定量的基础表达。足底注射甲醛后各时间 点组与Control组相比，HO．1蛋白表达均明显上调，表现为 optical 高最为明显，达到峰值。足底注射甲醛后72小时，脊髓后 角左、右两侧的HO．1表达较F24h组明显降低，但仍高于 Control组水平。各时间点左、右两侧脊髓后角比较，HO．1 蛋白表达无明显差异。 2HO／CO在甲醛炎性痛诱导大鼠脊髓神经元凋亡中的作用 中文摘要 (F+50肛g Z组)，每组 后足底注射甲醛，于注射甲醛后72小时断头取脊髓腰5(L5) 节段，采用流式细胞技术检测脊髓神经元凋亡率。 结果发现：与F组比较，F+DMS0组动物自发痛反应程 度无明显改变，表明鞘内注射溶剂DMSO对动物自发痛反应 无明显影响；在F+50}tg Z组和F+100pgZ组动物中观察到， 发痛反应程度明显降低，并且鞘内注射ZnpplX对自发痛反 应的抑制程度随着ZnpplX剂量增大而更加显著。 流式细胞技术结果显示：Control组大鼠脊髓神经元凋亡 率较低。与Control组比较，F组大鼠脊髓神经元凋亡率明显 升高，F+DMSO组与F组相比，大鼠脊髓神经元凋亡率无明 显差别，表明鞘内注射溶剂DMSO对大鼠脊髓神经元凋亡率 Z组大鼠和F组大鼠比较，脊髓神经元 无明显影响；F+50pg 凋亡率无明显差异，但增大ZnpplX剂量，预先鞘内注射 Z组大鼠脊髓神经元凋亡率 100pgZnppIX，则可使F+100I．tg 明显升高；这一结果表明，甲醛炎性痛诱导的HO／CO系统 活动增强可以抑制神经元凋亡过程。 3结论 甲醛炎性痛可诱导脊髓后角HO．1表达增多，注射甲醛 后24小时HO．1表达增多最为明显。 甲醛炎性