口服减毒鼠伤寒沙门氏菌介导ePNPMePdR自杀基因系统对荷瘤鼠协同抗肿瘤作用的探究.pdf

录 中文 摘 要 ·························································… … 2 英 文 摘 要 ·························································… … 3 第 一部分 pEGFP一C l一PNP 的构建和减 毒 鼠伤寒 沙 门氏菌介 导其在体 内外 的表达 ············…… 5 第 二部 分 口服减 毒 沙 门 氏菌介 导 ePNP/M ePdR 自杀基 因系统 的协 同抗肿 瘤 作用 ············……25 第三 部分 口服减毒沙 门氏菌介 导双 自杀系统 的联合抗肿瘤作用 ······························……46 第 四部 分 口服减毒 沙 门 氏菌 介 导 ePNP/ M ePd R 系统 与细胞 因子 m IL 一12 的联 合抗肿瘤 作用 ···… … 63 综述 (一) 利用减毒沙 门氏菌 治疗肿瘤 的研 究进 展 ···……82 综述 (二) 自杀基 因疗 法 : 肿瘤 治疗 新策 略 ············……94 缩 略词 ·························································… … 110 硕 博连 读 期 间获奖 、发表 和 提 交论文 目录 ············…… 111 致 谢 ····························································… … 112 减 毒沙 门氏菌 介 导 ePNP/M ePdR 系统 的抗肿瘤 研 究 2007 口服减 毒 鼠伤 寒沙 门氏菌介 导 ePNP /M ePdR 自杀基 因系统对荷瘤 鼠协 同 抗肿瘤 作用 的研 究 摘 要 随着 细菌 学和分子生物 学 的发展 ，拓 宽 了细菌介 导肿瘤 治疗 的思路 ，减 毒沙 门 氏菌载 体 系 统作 为 治疗恶性肿瘤 的呈递 工 具逐 步得 到人们 的认可 。沙 门 氏菌 是兼 性 厌氧 菌 ，在好氧和厌氧环境都 能生长 ，所 以可在肿瘤 的厌氧环境繁殖 。为 了使沙 门 氏菌 成 为 安全 的基 因传递 系 统 ，通 过 突变 代谢 过程 的基 因来 限制其致病 性 ， 降低 毒 性 ，使 它可在 生长 旺盛 的肿瘤 中积 聚 。体 内外 实验 发现 ，减毒沙 门氏菌培养方 便且 可将 含 外源 基 因 的质粒转 至 哺乳 动 物 细 胞 内，促进 了减毒 沙 门 氏菌载 体 系 统 的应用 。 ePNP/M ePdR 自杀基 因系统作 为一种 基 因导 向性 酶前 药 治疗 法 (gene 一d irected enZym e prodrug therapy ，GDEpT ) 正受 到越 来越 多 的关注 。6一甲基 嘿 吟一2 ‘一脱氧 核昔 (6一m ethy lpur ine 一2 ‘一deoxyr iboside ，M ePdR ) 本 身 是无毒 的药物 前 体 ，可 被 大 肠 杆 菌 (E seher 了eh ja eoli) 的 嘿 吟 核 营 磷 酸 化 酶 (pur ine nue leoside pho sphory lase，ePNP ) 分解 成有 毒 的 6一甲基 嘿 吟 (6一m ethy lpur ine ，M eP ) 。M eP 会抑 制 DNA 、RNA 和 蛋 白质合成 ，高 效 杀伤 肿瘤 细胞 ; 哺乳动 物来 源 的 PNP 则 不 能分 解 M ePdR 。由于 ePNP/M ePdR 自杀基 因系 统有 强大 的旁观 者 效应 ，可 以杀伤 非 增 殖 期 的肿 瘤 细 胞 ，它被认 为是 治疗 神 经 胶质 瘤 、肝 癌 、胰 腺癌 、卵巢癌 、前列 腺癌 、结 肠癌 、黑色 素瘤 等人类 恶 性 实体瘤 的最 佳选