T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇全抗原的合成及鉴定.pdfVIP

第 44卷 第 1期 卫 生 研 究 Vo1．44 No．1 2015年 1月 J0URNALOFHYGIENE RESEARCH Jan． 2015 95 文章编号：1000-8020(2015)01-0095—04 ·实 验 研 究 · T一2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇全抗原的合成及鉴定 张新 王丹 陆晶晶 周爽 赵云峰 吴永宁 国家食 品安全风险评估 中心 卫生部食 品安全风险评估重点实验室，北京 100021 摘要：目的 分别合成 T一2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的全抗原。方法 采用琥珀酸酐法对分子结构进行修饰 ，产生易反应 的官能团，并与载体蛋 白偶联 ，从 而具备免疫条件 ，用高性能基质辅助激光解吸电离．飞行 时间质谱仪 MALDI—TOF检 测偶联物及偶联蛋 白的分子量 ，用商品化的T．2和 DON免疫试剂盒与偶联物进行棋 盘滴定验 证 。结 果 T一2和 DON 的全 抗 原 及 BSA 的分 子 量 分 别 为 67641．6、 66680．4、66297．7，偶联物与免疫试剂盒 中T-2和 DON 的抗体均呈 阳性反应 。结论 合成的T．2、DON全抗原为相应抗体的制备和免疫学方法的建立奠定了基础。 关键词：T．2毒素 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 全抗原 基质辅助激光解吸电离．飞 行时间质谱仪 中图分类号：R155．51 TS207．4 文献标志码 ：A Preparation ofcharacterization ofcompleteantigenof T ·2toxin anddeOxyniValenOl ZHANG Xin，WANGDan，LU Jingjing，ZHOUShuang，ZHAO Yunfeng，WUYongning KeyLaboratoryofFoodSafetyRiskAssessment，NationalCenterforRiskAssessmentofFoodSafety，Beijing 100021，China Abstract：Objective To synthesize the completeantigen ofT一2 toxin and deoxynivalenol(DON)，respectively．Methods T一2toxinandDONwerecoupledwith carrier protein after derivation with succinic anhydride． Molecular weights of the conjugatesandcarrierproteinweredetectedbyMALDI—TOF．Andtheperformanceof complete antigens were further validated by chequerboard titration using commercial immunoassaykitsforT-2toxinandDON．Results ThemolecularweightsofT-2，DON conjugatesandBSAwere67641．6，66680．4and66297．7，respectively．Conclusion Thepreparation ofcomplete antigen ofT一2 and DON willgreatly facilitated antibody productionand immunoassaydevelopment． Keywords：T一2，deoxynivalenol，artificialantigen，MALDI—TOF 单 端 孢 霉 烯 族 毒