CPEPSPS转基因棉花植株鉴定方法比较分析-中国农业科学院.PDF

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2017, 33 4 :114-118 - 转基因棉花植株鉴定方法比较分析 CP4 EPSPS 郭文芳  王楠  李刚强  许芳芳  杨彩峰  刘德虎 （中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081） 摘 要 ： - 是从土壤农杆菌CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛 CP4 EPSPS 选标记基因。但是在 - 转基因植物后期筛选过程中仅凭简单的草甘膦抗性筛选并不能得到完全准确的鉴定结果，常会出 CP4 EPSPS 现假阳性或漏选的情况。本研究以抗草甘膦转 - 基因棉花为材料，对PCR 扩增、ELISA、CP4-EPSPS 蛋白检测试纸条及 CP4 EPSPS 草甘膦抗性四种转基因阳性植株筛选方法进行比较，从筛选结果的准确性、时效性、易用性及实惠性等不同方面综合分析了各种 筛选方法的优缺点，结果表明ELISA、试纸条检测方法的准确性显著高于PCR 检测与0.3% 浓度草甘膦抗性检测，而试纸条检测 操作更加便捷，因此建议将草甘膦抗性与试纸条检测方法结合起来使用。本研究结果为以 - 基因为标记筛选的转基因植 CP4 EPSPS 物的室内及大田筛选提供实验依据。 关键词 ： 转基因棉花 ； - ；草甘膦抗性 ；转基因植株筛选 CP4 EPSPS DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2017-0250 - Comparative Analysis of Identification Methods of CP4 EPSPS Transgenic Cotton Plants GUO Wen-fang WANG Nan LI Gang-qiang XU Fang-fang YANG Cai-feng LIU De-hu （Biotechnology Research Institute ，Chinese Academy of Agricultural Science ，Beijing 100081 ） : - isolated from strain CP4 is a glyphosate resistant gene and one of the most commonly used marker Abstract CP4 EPSPS Agrobacterium genes in transgenic plant research. However，we found that investigated results of the transgeni