光电检测及信息处理技术基础上纳米金免疫层析测纸定量测试概述.docVIP

　　光电检测及信息处理技术基础上纳米金免疫层析测纸定量测试概述 --第 一 章 绪 论 1.1 本课题研究的目的及意义 免疫测定是使用抗原抗体应声检测标本中微量物质的要领。基于抗原抗体应声的特异性和敏感性，免疫测定的应用范畴遍及医学查验的各个范畴。任何物质只要能得到相应的特异性抗体，即可用免疫测定举行检测。由于免疫测定在医学查验中的职位地方日益告急，比年来新要领、新技能不停推出。从总体上说，其渴望告急是在主动化[1-3]测试和轻便化[4-5]测试这两方面。 目前用于免疫测定全自动化的方法主要有：固相酶免疫测定(Enzyme LinkedImmunosorbent Assay ， ELISA) 、 时 间 分 辨 荧 光 免 疫 测 定 (Time ResolvedFluorescence Immunoassay，TRFIA)、化学发光免疫测定(Chemi LuminescenceImmunoassay，CLIA)等。酶联免疫检测法（ELISA 分析仪）曾是常规检验中较常用的一种方法。该方法成本较低，可以用于大量标本的测定，但测定时间长，灵敏度较低，已基本被其它方法取代。时间荧光免疫测定往往受血清成分、试管、仪器组件等本底荧光以及激发光源的杂散光的干扰，使灵敏度受到影响。最具代表性的是由芬兰 annheim 公司开发的免疫测定系统称为 ELECSYS，1997 年投入大批量生产。近几年 CLIA 发展迅猛，已成为目前发展和推广应用最快的免疫分析方法之一，其技术在全自动化固相标记免疫测定中居领先地位。 ................................. 1.2 纳米金免疫层析试条免疫测定的研究现状 纳米金免疫层析试条（简称胶体金层析试条或金标试条）主要利用了直径在1～150nm 之间的胶体金颗粒具有高电子密度的特性，当胶体金标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色线条，因而常用于定性的快速免疫测定方法中[16-17]。1971 年胶体金被引入免疫化学，作为一种免疫标记技术被使用而迅速发展[18-19]，特别是近 20 年来胶体金标记已经成为一项重要的免疫标记技术，越来越受到相关研究领域的重视。目前电镜水平的免疫金染色(IGS)，光镜水平的免疫金银染色(IGSS)，以及肉眼水平的免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具[20]。 ................................... 第二章 纳米金免疫层析试条定量测试机理 纳米金免疫层析试条定量测试过程实际上是生化、光、电的综合调制过程。传统测试通常只考虑试条的生化性能，因而相应的改进措施也仅停留在试条材料选择和生化性能分析的层面上，如吸水纸的材料、硝酸纤维素膜的材料、纳米金颗粒的大小和标记抗体的量等。因此目前纳米金免疫层析试条主要用于定性或半定量测试，定量测试进展缓慢。 为了加快试条定量测试的研究速度，本文将计算机技术、传感技术、人工智能等技术与生化反应相结合，提出一种新的研究思路，即尝试将纳米金免疫层析试条作为一级传感器，光纤传感器作为二级传感器，用人工智能及现代信息处理技术对由纳米金免疫层析试条产生的光谱峰特性曲线进行描述，并深入分析影响光谱峰曲线的各种因素，从而确定定量测试的方案。 ................................. 2.1 纳米金免疫层析试条 纳米金免疫层析试条作临床诊断，由于其具有直观、检测效率高、方法简便、无污染、费用低廉等优点，近年来得以迅速发展。它应用了抗原、抗体特异性规律及胶体金显色的基本原理，当试液（可取血、血清、尿、唾液，视被检项目而定）浸泡或滴入试条时，试液通过吸水纤维的毛细作用，将胶体金一起带到吸附有抗体的测试线上。若试液中的抗原与此抗体相对应，则产生特异性结合，测试线呈红色或紫红色[114]；反之，测试线不显色。应用以光纤传感器为核心的光电检测系统分析测试线的光谱形状和峰值，可得出与测试线颜色呈正相关的待测液浓度。 纳米金（Nanogold）是指金微小粒子，粒子直径一般为 1～100nm，金颗粒表面带有负电荷，由于静电的排斥力,使其在水中保持稳定状态，形成稳定的胶体，故又称胶体金。由于胶体金的颗粒表面带有较多的电荷,能够对蛋白质等高分子物质进行吸附结合。利用这种表面吸附作用，使蛋白质吸附在金溶胶颗粒表面就得到胶体金标记蛋白质。由于金颗粒具有高电子密度的特性,且这些标记物在固相载体上聚集达到一定密度时(即当金颗粒 107/mm2)可呈现肉眼可见的红色至紫红色。本世纪七十年代，由于纳米金这一独特优点，将其作为标记物引入免疫学实验，形成了现代免疫学四大标记技术之一的金标记技术，得到了广泛应用。 ...................................... 第