代谢工程和调控+第五章课件.ppt

第七章支架技术及RNAi藩摹乱;目录蛋白质支架DNA支架RNA;支架技术？？？私蜀舵蓬制酞钟松;代谢途径的中间产物可能对宿主产;αreaction由丝氨酸合成;多酶复合物的晶体结构多酶复合物;将合成途径的酶组合成多酶复合物;酶的合成支架技术为途径中两个或;许多信号蛋白包含模块化的蛋白质;蛋白质支架的应用---甲羟戊酸;三种酶的活性不同，存在 HMG;通过蛋白质支架将 HMG-Co;蛋白与蛋白的相互作用区域与配体;途径中的限速酶是HMGR，需要;AtoB以及HMGS和HMGR;九个不同的多酶复合物表现出很大;蛋白质支架的应用---葡糖二酸;DNA 之间可以通过杂交进行结;DNA支架应用---用于GOx;组装的DNA纳米结构，由单条的;酶与DNA支架结合通过赖氨酸残;分别以两个六面体和四个六面体的;DNA支架需要与生物大分子结合;RNA支架及其应用原理优缺点在;RNA支架可合成一维或者二维的;RNA 支架(D0)结构模块中;RNA结构中包含二聚??域(DD;将带有两个蛋白适配体域的RNA;荧光互补实验表明，二维 RNA;RNA干扰涛阑爪剖链评漏罢灌围;RNA interferenc;法尔和梅洛则首次在线虫身上揭示;可惜的是，郭苏和坎菲斯一直没能;RNAi现象的普遍性RNAi现;RNA干扰的机理晚删茄李娟疏铸;参与RNAi反应的酶Dicer;RNA诱导的沉默复合体(RIS;RNAi的反应过程 1.双链R;RNAi的应用RNA干扰作为一;1真核体系中的RNA干扰23最;sRNA应用在代谢工程中的应用;优点1.较高特异性：能够非常特;在大肠杆菌中使用小RNA干扰基;sRNA质粒库的构建a.模板质;应用a.筛选菌株b.筛选基因靶;应用实例 ;合成的sRNA的结构大部分sR;支架的筛选101个已知的sRN;不同结合区域与抑制效果的关系结;具体实例一：运用sRNA干扰策;质粒4、3-4、1-4、2-4;具体实例二：运用sRNA干扰策;在大肠杆菌中使用小RNA干扰基;asRNA的环的长度与干扰效率;asRNA的环的长度与干扰效率;在脂肪酸合成途径中， fabD;构造FabD/eGFP 融合蛋;浅蓝色---对照组深蓝色---;在其他途径中引入asfabD，;瞧点显畸红纺亥滚扯叼吸癸过湛淫;问题原因策略刚舔喝楞划奋扫绒仔