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　　国内外对猪肺炎支原体的最新研究情况探索 --国内外对猪肺炎支原体的最新研究情况探索 [摘　要]　猪支原体肺炎是一直困扰养猪业发展的重要疾病之一。本文综合国内外对其病原—猪肺炎支原体的最新研究情况,从其对猪生长性能的影响、防治动向、检测、主要抗原的研究、基因工程疫苗研制等五个方面进行讨论。 [关键词]　猪肺炎支原体 猪支原体肺炎 防治 进展 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(MPS,又称“喘气病”)的病原微生物。MPS以接触性、高度传染性、慢性、高发病率和低死亡率为特点,主要表现为咳嗽、呼吸困难,解剖可见肺组织肉变或大理石样病变。其主要危害是引起猪的生长受阻和饲料转化率大幅下降。高的发病率使其严重影响养猪业的经济效益。猪喘气病流行于世界各地,在畜牧业发达的美国、澳大利亚等国普遍存在,也是对我国养猪业造成严重经济损失的主要疾病之一[1,2]。据初步统计,该病每年给我国造成的直接经济损失高达40亿元。为了能有效预防和治疗该疾病,各国都展开了广泛的研究,我国已就该问题开展了“六五”、“七五”、“八五”国家攻关课题研究并取得了丰硕的成果。 1　Mhp对猪生长性能的影响 Mhp导致的疾病在商业猪场比较普遍,一般不会引起猪的死亡,因而其危害容易被人们所忽视。hp的高感染率,使其对猪生长性能的影响易被忽视。但通过对试验感染Mhp的猪与非感染猪的生产性能进行比较发现,Mhp对猪肉生产造成的危害严重。Pointon AM等[4]使用猪肺炎支原体野毒株自然感染生长仔猪以评估猪流行性肺炎对生产性能的影响,结果发现在从50 kg生长到85 kg体重的过程中,感染组猪的生长率比阴性对照组低12.7%(P 2　Mhp的防治动向 Mhp是一种顽固性慢性致病病原微生物,某些药物治疗可以抑制但不能根除它,一旦某猪场流行该病,就很难根除,停药后很快复发。目前最好的办法是免疫预防。但至今所使用的猪肺炎支原体疫苗大多是灭活疫苗,免疫效果均不理想,保护率低。我国在“六五”、“七五”、“八五”期间均组织了国家攻关课题研究,培育出了一株毒力弱、免疫原性好的Mhp兔化弱毒株,经试用表明该菌株制成的疫苗安全有效,能使80%的免疫猪在强毒攻击后肺组织不出现任何病变,而对照组全部发病,是世界上首先成功研究出的猪喘气病弱毒疫苗,而且其保护率至今仍是最高的。但该疫苗也存在一定的缺陷,即产量低、成本高、反应较大,此外采用胸腔注射的免疫途径不容易被一般用户所接受,因而在推广应用上受到限制。目前世界上使用的Mhp疫苗仍以灭活疫苗为主,也有少数基因工程疫苗和弱毒苗。PallaresFJ等[5]对一种Mhp疫苗田间试验中的流行性指标进行评价,结果发现使用Mhp疫苗后可使育肥猪的死亡率下降1.89%(P 3　Mhp的检测 随着人们对Mhp危害的不断认识,Mhp的检测手段也迅速发展。目前检测Mhp的方法可分为两大类,即血清学方法和分子生物学方法。 3.1　血清学诊断方法　 这是一种传统的检测方法,是通过检测血清中抗Mhp抗体水平以判断猪是否患有喘气病,主要包括间接血凝试验(IHA)、补体结合试验(CFT)、ELISA以及放射免疫酶试验(RIDEA)等。Freeman MJ等[9]通过ELISA、CFT试验以及剖检来评价IHA,在检测自然感染Mhp的猪血清时发现,IHA在检测中存在着检测滴度低、结果与感染的相关性低、凝集终点判定的主观性较强以及本身固有的技术缺陷等问题,因此IHA在商品猪群的MPS检测中实际应用前景有限。Bereiter M等[10]对CFT、ELISA和RIDEA的敏感性进行评价:在人工感染后13 d,被感染猪开始咳嗽,CFT在2周后检测到Mhp抗体,ELISA是在3周后检测到,RIDEA是在5周后才开始检测到Mhp抗体。血清学诊断简单方便,但仍存在较多缺点,如检测有些滞后,而且难以区分抗体来自于使用疫苗还是感染Mhp。 3.2　分子生物学诊断方法　 包括PCR和核酸杂交等。其主要特点是通过检测病原的遗传物质以确定是否存在该病原。Artiushin S等[11]通过对Mhp的一个DNA克隆片段进行序列分析,合成一对PCR引物,对40个Mhp野毒株和4个M.Flovvulare(MF)以及Mhp模式株进行特异性反应测定,发现所建立的PCR方法具有较强的特异性和敏感性。Stemke Ghp、MF和人肺炎支原体。扩增产物的电泳结果是Mhp为200bp,而MF为400 bp,人肺炎支原体无任何扩增带。Caron J等[13]通过扩增Mhp的P36和P46蛋白基因检测和区分Mhp和猪鼻支原体感染。此外还有采用套式PCR检测猪鼻拭子或猪舍空气样品以确定是否感染Mhp,这进一步提高了检测的灵敏度和特异性。 4　Mhp主要抗原的研究 由于