肉桂多酚检测方法及有关概要.docVIP

肉桂多酚检测方法 1. 目的 建立紫外分光光度测定多酚含量标准检验操作规程。 2. 范围 适用于提取物中多酚含量检测。 3. 对照品 没食子酸（Gallic acid , C6H2(OH)3COOH·H2O） 4. 试剂 4.1钨酸钠（Na2WO4·2H2O，分析纯） 4.2钼酸钠（Na2MO4·2H2O，分析纯） 4.3碳酸钠（Na2CO3·10H2O，分析纯） 4.4盐酸（分析纯） 4.5 85%磷酸（分析纯） 4.6溴（分析纯） 4.7硫酸锂（Li2SO4·H2O，分析纯） 4.8水（蒸馏水） 5. 仪器 5.1 紫外-可见光分光光度计 5.2 分析天平：感量0.00001g 5.3超声波清洗仪：功率250W，频率40KHz 5.4 玻璃量器：量筒（100ml）刻度试管，棕色容量瓶等。 5.5 电热套 6. 溶液的制备 6.1 磷钼钨酸试液（phosphomolybdotungstic reagent ） 取50g钨酸钠,12.5g钼酸钠于1000ml的圆底烧瓶中，加入350ml水溶解，加25ml 85％磷酸，50ml浓盐酸在电热套上加热回流10h,放冷，加硫酸锂75g和0.1ml溴，开口煮沸15分钟除去残留的溴，溶液的最终颜色为黄色，无蓝色和绿色痕迹（如果为绿色，可加入0.2ml溴，煮沸除去多余的溴），冷却至室温后加水定容至500ml,过滤，置棕色瓶中备用(应在2-8℃储存) 6.2 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸约50mg于100ml的棕色容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5ml,置50ml的棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含没食子酸0.05mg） 。 6.3 样品溶液的制备 精密称取样品适量(相当于多酚2.5mg)约50mg于50ml容量瓶中，加水约40ml，超声提取30分钟后，放置至室温，用水定容至刻度，摇匀，过滤，即得样品溶液。 7. 测定 精密吸取样品溶液和对照品溶液各2.0ml于25ml的容量瓶中，加磷钼钨酸试液1ml再分别加水10.0ml，用29%碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在760nm的波长处测定溶液的吸光度。 8. 结果计算 按照下面的公式计算样品多酚的含量。 Ax×Ws 含量（％）= ×100% Wx×As×20 式中： Ax — 样品溶液的吸光度值； As — 对照品溶液的吸光度值； Ws — 对照品的称样量（mg）； Wx — 样品的称样量（mg）。