一先天性睑裂狭小综合征家系 FOXL2基因的突变检测.pdfVIP

广东医学 2014年5月 第35卷第 10期 GuangdongMedicalJournal May．2014，Vo1．35，No．10 · 1583 · 表 1 PCR扩增 FOXL2基因的引物 1．2．3 产物纯化、序列测定及分析 PCR产物纯化 与BPESⅡ型有关 ，而突变导致编码蛋白质在聚丙氨酸 (华舜 DNA回收试剂盒)后送至上海生工生物工程技 区前被截断则与 BPESI型相关。而那些包含有完整 术服务有限公司，在 ABI3730自动测序仪上应用相应 的聚丙氨酸肽段和 Forkhead的突变 ，蛋白无论是截短 的PCR引物进行双向直接序列测定，测序结果使用 的还是延长的，都可导致两型 BPES，其功能还不能准 DNAStar软件进行分析。 确预测 ，说明BPES患者 FOXL2突变基因与其表型有 2 结果 一 定的对应关系。随后在不同的国家地区及不同人种 均发现 BPES患者 的FOXL2基因突变 。目前 ，已 应用 PCR直接测序技术，对该家系先证者进行 有近 30种FOXL2基 因突变在国内BPES患者 中被检 FOXL2基因全部编码区的突变检测，发现FOXL2基因 测出来。2006年 ，TANG等 在2个BPES家系及 1例 C．672_701dup30杂合突变 (图3)，该突变导致多肽链 散发患者中检测到C．672—701dup30突变 ，该突变导致 第 224位 重 复 插 入 l0个 氨 基 酸 (P．Ala224一 多聚丙氨酸链 10个氨基酸的扩增 ，为国内首次报道的 Ala234dup)，使原多聚丙氨酸链数 由14增加到24，产 BPES患者 FOXI2基 因重复突变，DEBAERE等 对 生一个延长的蛋白质 (386个氨基酸)。家系中的其他 国外 28例 BPES患者进行 FOXL2基 因检测，发现 3例患者均发现有 FOXL2基因的相同突变 ，该突变在 c．672_701dup30为 突变 热点 之一。齐艳 华等… 、 国内BPES家系中曾有报道。家系中的正常人及50例 WANG等 和叶娟等 在国内2例散发患者和5个 正常对照均未见此突变。 家系中检测 到相 同突变，证 明这一突变也是 国 内 3 讨论 F 基因突变热点。 FOXL2基因编码 的蛋 白为一跨膜蛋 白，属于翼状 我们研究的BPES家系中，患者主要表现为睑裂 (Winged)或又头状 (Forkhead)转录因子大家族 ，其编 狭小、上睑下垂 、倒转型内眦赘皮 ，除眼部表现外无其 码区包含特征性 DNA结合 Forkhead结构域 (编码蛋 白 他系统疾病 ，男女患者均无生育功能障碍。我们进一 位点52～152)和位于其下游的Poly—Ala串(编码蛋 步用分子遗传学方法检测到该家系4例患者均存在 白位点 221～234) 。在 BPES的致病基 因定位