冷沉淀制备和应用范围.doc

冷沉淀的制备及应用范围 冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~6℃条件下不溶解的白色沉淀物，它是P00l博士在1964-1965年期间发现的，被加热37℃时呈溶解的液态，主要含有第Ⅷ因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子(VWF)、第ⅩⅢ、以及纤连蛋白等成分。现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。 1　冷沉淀的制备与质量 1.1　冷沉淀的制备　选取健康无偿献血者,各项检查指标合格,采集400 mL全血后6~8 h内经分离新鲜液体血浆于-50℃冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30℃保存。制备冷沉淀时,将-30℃保存血浆放置于1~6℃环境下溶解、分离出冷不溶物,放置-30℃冻存或直接应用于临床。 1.1.1离心法(Pool) 1.1.1.1原料血浆的融化 1.1.1.1.1 4℃冷藏箱法：将原料血浆从-30℃冰箱内取出，置于1~6℃冷藏箱内缓慢融化。 1.1.1.1.2 水浴融化法：将原料血浆从-30冰箱取出，值室温5分钟，待双联袋间的塑料管变软后，放入15℃水浴箱内，启动摇摆装置，约30分钟后温度调至4℃，当原料血浆袋全部融化时(约60~90分钟)，然后把水温调至0~2℃。 1.1.1.2融化后的原料浆于0~4℃以离心力2000g离心10分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液,剩20~30 mL左右即为冷沉淀。 1.1.2连续融化虹吸法(Mason),将原料浆袋置于1~6℃水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的落差，血浆溶化后随时被虹吸至空袋内，当融化至剩下40~50ml时，闭合导管，阻断虹吸，将冰冻血浆袋和冷沉淀热和断离。 1.2　冷沉淀的质量　冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第Ⅷ因子含量偏低;说明温度对冷沉淀质量有影响。经研究使用亚甲蓝光照法(MB)进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较,Ⅷ因子和血管性血友病因子(Vwf)活性分别别下降30%和11%,纤维蛋白原浓度下降40%。血液4℃保存18 h其Ⅷ因子含量与6℃保存6~8 h相比下降23%,冷沉淀制备时间对凝血因子含量有影响,FFP一旦融化,Ⅷ因子活性随时间延长而明显降低,12 h衰减41.17%,24 h衰减42.82%,改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀FⅧ含量明显高于Pool。因此,制备冷沉淀一定要控制好各方面影响因素,包括时间、温度、制备等,同时选择制备方法,采血过程的冷链控制,只有保证血浆中各种凝血因子的有效成分,才能制备出高质量的冷沉淀。 1.3　冷沉淀的