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达亚美操作程序.
ABO正/反定型和RhD血型检测卡操作规程
样本要求:血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。
若需要用血清替代血浆进行检测时,应在用前离心,1500g×10min,以免纤维蛋白物残余干扰反应结果。
样本准备:5%样本红细胞制备:
压积红细胞25 μl或全血50 μl悬浮于0.5 ml达亚美2号稀释液中。
配套试剂:ABO正/反定型和RhD血型检测卡
2号稀释液
标准红细胞A1和B
操作步骤:
取50μl A1,B 标准细胞(0.8%)分别加入A1,B管中。
取50μl 血清或血浆加入A1,B管中。
取10μl 5% 样本红细胞加入A, B, D, Ctl管中。
离心10 分钟。判读结果。记录。
结果解释:
1、阳性(+):细胞在凝胶表面凝集成一条红线或散布在凝胶中。
阴性(-):细胞沉积在管底。
双相(d.p.):既有阳性结果,同时也有阴性结果。
溶血(Hemo):红细胞溶解,作为阳性结果对待。
2、ABO血型判断
血型
抗原 与抗血清反应 与A1、B细胞反应 抗-A 抗-B A1 B A A ++++ - - +/++++ B B - ++++ +/++++ - AB A,B,AB ++++ ++++ - - 0 H - - +/++++ +/++++
Rh D血型判断
+++~++++ ±~++ 阴性 Rh D阳性 Rh D弱阳性 Rh D阴性 抗 体 筛 选 操 作 程 序 操 作 规 程
(间 接 抗 人 球 法IAT)
样本要求:血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。
若需要用血清替代血浆进行检测时,应在用前离心,1500g×10min,以免纤维蛋白物残余干扰反应结果。
配套试剂:低离子抗人球蛋白卡
2号稀释液
抗体筛选标准红细胞
抗原格局图
操作步骤:
取50 μl试剂红细胞悬液至低离子/抗人球卡各微管中。
取25 μl待检血浆/血清加入各管中。
37℃孵育15 min。
离心10 分钟。判读结果。记录。
结果解释:
1、阳性(+):细胞在凝胶表面凝集成一条红线或散布在凝胶中。
阴性(-):细胞沉积在管底。
双相(d.p.):既有阳性结果,同时也有阴性结果。
溶血(Hemo):红细胞溶解,作为阳性结果对待。
2、抗体筛选结果:
阴性表示被检血浆/血清未发现不规则抗体;
阳性表示有不规则抗体。将结果与试剂红细胞的抗原格局图比对,初步确定抗体类型,并进一步检测以鉴定抗体。
交 叉 配 血 操 作 程 序 操 作 规 程
样本要求:血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。
若需要用血清替代血浆进行检测时,应在用前离心,1500g×10min,以免纤维蛋白残余干扰反应结果。
样本准备:0.8%样本红细胞制备:取10μl压积红细胞至1ml达亚美2号稀释液中。
配套试剂:低离子抗人球蛋白卡 2号稀释液
操作步骤:
取0.8%供体红细胞悬液50 μl至低离子/抗人球卡主侧管中;取0.8%病人红细胞悬液50 μl至低离子/抗人球卡次侧管中。
取25 μl病人血浆/血清加入主侧管中;取25 μl供体血浆/血清加入次侧管中。
37℃孵育15 min。
离心10 分钟。判读结果。记录。
结果解释:
1、阳性(+):细胞在凝胶表面凝集成一条红线或散布在凝胶中。
阴性(-):细胞沉积在管底。
双相(d.p.):既有阳性结果,同时也有阴性结果。
溶血(Hemo):红细胞溶解,作为阳性结果对待。
2、交叉配血结果:
阴性表示配血成功;
阳性表示配血不成功,需进一步检测。
新生儿溶血症的“三项试验”操作规程
样本要求:血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。
若需要用血清替代血浆进行检测时,应在用前离心,1500g×10min,以免纤维蛋白残余干扰反应结果。
样本准备:0.8%样本红细胞制备:取10μl压积红细胞至1ml达亚美2号稀释液中。
配套试剂:低离子/抗人球卡,2号稀释液,A1、B标准红细胞,抗体筛选标准红细胞,DiaCidel洗涤液(用前以蒸馏水1:10稀释),DiaCidel放散液,DiaCidel缓冲液
操作步骤:
红细胞直接抗球蛋白试验(DAT)
取新生儿脐带血,用达亚美2号稀释液(ID-Diluent2)配0.8%的红细胞悬液。
在低离子/抗人球卡中加入50μl上述红细胞悬液。
离心10分钟,判读结果。记录。
游 离 试 验(IAT)
取新生儿脐带血,离心,取血浆。
在低离子/抗人球卡中分别加入50μl 0.8%的标准红细胞。
各孔均加入25μl新生儿脐带血清。
37℃孵育15分钟,离心10分钟。判读结
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