db-db自发性糖尿病小鼠颌下腺EGFR的表达及细胞凋亡关系的研究.doc

　　db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺EGFR的表达及细胞凋亡关系的研究 【关键词】 ,糖尿病；小鼠；颌下腺；基因；细胞凋亡 　　【Abstract】 AIM: To observe the expression of EGFR and the distribution of apoptotic cells in submandibular gland of db/db mutant diabetic mice and to explore their relationship. METHODS: Submandibular glands the selected 3, 4, 6, 8, 10 monthold db/db diabetic mice (n=25) and the agematched db/+m normal mice (n=25); Every age subgroup included 5 mice. The expression of EGFR and the distribution of apoptotic cells munohistochemistry and TUNEL.The results andibular gland from both diabetic mice and control mice. The percentage of EGFRimmunopositive cells and the number of apoptotic cells ice than those of control mice, and they shomunopositive cells increase ent of the disease, ay lead to the apoptosis of epithelial cells. The increase of apoptotic cells demonstrates that diabetes mellitus can induce apoptosis, ay be the reason of submandibular gland atrophy. 　　【Keyellitus; mice; submandibular gland; gene; apoptosis 　　【摘要】 目的：观察db/db自发性糖尿病小鼠颌下腺中表皮生长因子受体（EGFR）的表达及其与细胞凋亡的关系. 方法： 选取3，4，6，8，10月龄db/db糖尿病小鼠及相应月龄的db/+m正常小鼠颌下腺，应用SP免疫组织化学方法染色及TUNEL原位标记后进行图像分析，统计EGFR及凋亡细胞在颌下腺组织内表达（分布）的细胞阳性率. 结果：EGFR及凋亡细胞在对照组及糖尿病组颌下腺中均有表达（分布）. db/db糖尿病小鼠颌下腺EGFR及凋亡细胞阳性率随病程延长均呈增高趋势，且显著高于对照组. 结论：EGFR表达增多，说明糖尿病时EGFR作为多效应受体，被激活后可能诱导了颌下腺的细胞凋亡. 凋亡细胞阳性率的显著增高，提示糖尿病是加剧颌下腺腺体萎缩，功能受损的原因. 　　【关键词】 糖尿病；小鼠；颌下腺；基因；细胞凋亡 　　0引言 　　糖尿病（Diabetes mellitus）是危害人类健康的常见病及多发病，糖尿病随病情发展，可造成多个器官细胞增殖与凋亡的平衡破坏，导致器官的损伤及功能障碍. 颌下腺作为较大的唾液腺能产生多种生物活性物质，对人体各种功能起重要调节作用，迄今颌下腺与糖尿病的关系目前研究较少，本实验应用SP 免疫组化及TUNEL原位标记，对表皮生长因子受体（epidermal gro转基因小鼠200只，雌雄各半，无菌级，分笼饲养于无菌包中，自由摄食（钴60照射饲料）,饮水（高压消毒蒸馏水）,近亲（兄妹）交配. 该小鼠的第4号染色体受单一劣性糖尿病基因支配，并与肥胖基因连锁在一起，与浅色毛基因分离，两个连锁基因与浅色毛基因在传代中遵循基因的自由组合和分离规律. db/代表肥胖和糖尿病基因,m代表浅色毛基因，db/+m型为糖尿病和肥胖基因携带者，其表型正常，故两个基因型为db/+m的小鼠产生的后代（雌雄纯合子个体）中，25%发生糖尿病和肥胖，即db/db型糖尿病鼠. 选取3，4，6，8，10月龄db/db型小鼠，即表型肥胖、血糖高于10 mmol/L小鼠,作为糖尿病组. 对照组选取相应月龄的同种db/+m小鼠. 每组5只. 　　1.2方法 　　1.2.1血糖及体质量测定每次测量血糖时，先用天平称其体质量，再断尾取血，并用美国强生微型血糖仪测定血糖值（每次测量血糖时间为上午9时、空腹）. 　　1.2.2标本制备20 mL/L戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,开胸,经