人肾透明细胞癌中EGFRvⅢ的表达及意义.doc

　　人肾透明细胞癌中EGFRvⅢ的表达及意义 ：段小艺，王健生，张明鑫，夏鹏 【摘要】 目的 检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在肾透明细胞癌组织中的表达，探讨其与肾透明细胞癌发生、 发展 的关系。方法 采用免疫组织化学染色和图像分析法检测80例肾透明细胞癌和24例正常肾组织中EGFRvⅢ的表达水平，进行统计学分析、比较。结果 肾透明细胞癌组织和正常肾组织EGFRvⅢ的表达阳性率分别为46%、8%。通过半定量分析，二者EGFRvⅢ平均灰度值分别为148.49±13.05和155.65±14.86，其差异具有统计学意义(t=2.13, P=0.04)；男、女患者EGFRvⅢ的平均灰度值分别为149.01±13.70和147.40±11.76，二者无显著性差异(t=0.54, P=0.59)；EGFRvⅢ表达与年龄无显著相关性(r=0.01, P=0.92)。结论 EGFRvIII在肾透明细胞癌组织中存在高表达，与肾透明细胞癌的发生、发展有一定关系。 【关键词】 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)；肾透明细胞癌；免疫组织化学；图像分析 　　ABSTRACT: Objective To detect expression of epidermal groan suprarenal epithelioma to explore its relation ent of suprarenal epithelioma. Methods Immunohistochemistry and pathologic image analysis iquantitatively detect the expression of EGFRvⅢ protein in eighty human suprarenal epithelioma tissues and tal renal tissues. Results Positive expression rate of EGFRvⅢ an suprarenal epithelioma tissues and 8% in normal renal tissues. Their average gray scale values ales and females (149.01±13.70 and 147.40±11.76, t=0.54, P=0.59). No significant association an suprarenal epithelioma tissues express EGFRvⅢ. EGFRvⅢ may play certain role in the genesis and development of human suprarenal epithelioma. 　　KEY al groa; immunohistochemistry; image analysis 　　肾癌是目前泌尿外科中常见的恶性肿瘤，而肾透明细胞癌占肾癌的70%-80%，它的发生与发展受到多种基因的调控。表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermal groal groed公司产品，1∶100稀释后作为Ⅰ抗(抗体效价为2×102)，生物素Ⅱ抗及DAB显色系统购自武汉博士德生物公司。采用免疫组织化学SABC法进行染色。利用Leica Q570c真彩图像分析仪(德国)及Nikon Eclipse E1000采图摄像系统(日本)对染色组织进行图像分析。 　　1.3 免疫组化染色及图像分析 　　免疫组化采用SABC法，石蜡切片常规脱蜡，梯度乙醇脱水，3%(体积分数)H2O2室温灭活30 min，微波抗原修复，正常山羊血清封闭30 min，加入Ⅰ抗4 ℃过夜，滴加Ⅱ抗，DAB显色、脱水、透明、封片。用已知的阳性切片作为阳性对照，用PBS代替Ⅰ抗作为阴性对照。 　　1.4 结果判定 　　显微镜下观察，以肿瘤细胞膜或胞质着色棕黄色或棕褐色者为阳性细胞。以每张切片中随机5个高倍镜(×40)视野阳性细胞数≥10%为阳性切片，lt;10%或未着色者为阴性。每例标本在光镜下随机选择3个高倍视野，采用病理图像分析系统测量每个视野灰度值， 计算 平均灰度值。灰度值越高表明相应蛋白表达越低，反之则表明相应蛋白表达越高。 　　1.5 统计学分析 　　采用SPSS 12.0统计软件中的t检验和Spearman相关分析对实验所得计数和计量结果进行分析，以Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　利用图像分析系统检测肾透明细胞癌和正常肾组织中EGFRvⅢ表达的平均灰度值，通过方差分析和t检验显示肾透明细胞癌EGFRvⅢ的表达较高，差异有统计学意义(Plt;0.05)。此外，依据性别分组，男、女患者EGFRvⅢ表达水