伴矿景天的组织培养初探 毕业论文.docVIP

伴矿景天的组织培养初探 1 材料与方法： 实验材料： 供试材料伴矿景天2008年7月取自中国科学院土壤研究所两年生苗移栽于南京晓庄学院生命科学系气候室中，取小苗幼嫩茎、叶片、叶柄为供试材料。 试验方法： （1）材料消毒处理：将伴矿景天茎、叶片、叶柄、带侧芽的茎在流水下冲洗1h，在无菌工作台上，用体积分数为70%的酒精浸泡30s，质量分数为0.1%的升汞溶液浸泡10分钟，无菌水冲洗8次。 （2）愈伤组织诱导：用消毒滤纸吸干消毒后叶片、叶柄、茎段、带侧芽的茎段表面水分，以MS为基本培养基，添加不同浓度植物生长调节剂进行愈伤组织诱导培养，每处理6瓶，每瓶接6个外植体，接种第30天，统计实验结果。 （3）不定芽诱导与增殖：将带侧芽的茎段切成0.3 cm×0.5 cm的小块转接到附加不同浓度生长调节剂的MS培养基上进行不定芽诱导，每处理6瓶，每瓶接6个外植体。待诱导出的不定芽长至2～3 cm，切下接入增殖培养基中进行培养，接种后40天统计实验结果。 5)培养条件：以上培养基pH值均为5.8，琼脂7 g/L，蔗糖30 g/L，在1.2 kg/cm2压力下灭菌20 min。接种后置于培养温度25±2℃，光照强度为1 000～1 500 lx，每天光照12 h的GXZ—160型智能光照培养箱中培养。 2　 结果与分析： 不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织诱导的影响： 不同植物生长调节剂激素组合的培养基对伴矿景天愈伤组织诱导率有明显影响。伴矿景天茎段、叶片、叶柄切块接种在含有6—BA和2，4-D的MS培养基后，1周后整体膨大,2～3周后从叶片、茎段、叶柄外植体产生大量疏松浅黄色或淡绿色愈伤组织。由表1可见，愈伤组织诱导率与6—BA浓度关系十分密切，在6—BA的浓度达到0.5 mg·L-1以前，愈伤组织诱导率随着6—BA浓度的增加而上升，此后，浓度继续增加则愈伤组织诱导率有所下降。在6—BA的浓度为0.5 mg·L-1的三个处理中，以培养基MS+6—BA0.5 mg·L-1(单位下同)+2,4-D1.5的愈伤组织诱导率最高，达到93.3%，且愈伤组织生长旺盛。在MS+6—BA0.5+ 2,4-D0.5和MS+6BA0.5+2,4-D2.5培养基诱导产生的愈伤组织生长十分缓慢，形成的愈伤组织逐渐褐化综上所述，不同激素组合的培养基对伴矿景天叶片、叶柄、茎段外植体的愈伤组织率有十分明显的影响，添加6—BA0.5和2，4-D1.5的MS对叶片愈伤组织的诱导最为有效。 表1　培养基对诱导八宝景天愈伤组织的影响 培养基 6-BA 2,4-D 外植体 愈伤组织 诱导率 　 （mg·L-1） （mg·L-1） 数目 　 数目 （%） MS 0.1 0.5 36 MS 0.5 0.5 36 MS 1.0 0.5 36 MS 1.5 0.5 36 MS 2.0 0.5 36 MS 2.5 0.5 36 MS 3.0 0.5 36 MS 3.5 0.5 36 MS 4.0 0.5 36 MS 4.5 0.5 36 MS 0.1 1.5 36 MS 0.5 1.5 36 MS 1.0 1.5 36 MS 1.5 1.5 36 MS 2.0 1.5 36 MS 2.5 1.5 36 MS 3.0 1.5 36 MS 3.5 1.5 36 MS 4.0 1.5 36 MS 4.5 1.5 36 MS 0.1 2.5 36 MS 0.5 2.5 36 MS 1.0 2.5 36 MS 1.5 2.5 36 MS 2.0 2.5 36 MS 2.5 2.5 36 MS 3.0 2.5 36 MS 3.5 2.5 36 MS 4.0 2.5 36 MS 4.5 2.5 36 培养基 6-BA 2，4-D 外植体 愈伤组织 出芽率 （mg·L-1） （mg·L-1） 数目 数目 （%） MS 0.2 0.5 36 MS 0.3 1.0 36 MS 0.4 1.5 36 MS 0.5 2.0 36 MS 0.5 2.5 36 MS 0.5 3.0 36 MS 0.5 3.5 36 培养基 6-BA NAA 外植体 愈伤组织 出芽率 　 （mg·L-1） （mg·L-1） 数目 数目 （%） MS 0.2 1.5 36 MS 0.3 1.5 36 MS 0.4 1.5 36 MS 0.5 1.5 36 MS 0.5 0.5 36 MS 0.5 1.0 36 MS 0.5 1.5 36 MS