转染MIP-1α和B7-1基因增强小鼠抗淋巴瘤效应的-中国试验动物学报.DOC

尊敬的老师， 您好！非常感谢您提出的宝贵修改意见，严格按照您的意见，具体修改的方面如下： 一、专家审稿意见 本文研究了小鼠EL-4淋巴瘤细胞转染MIP-1α和B7-1基因的效应，实验设计严谨，实验结果有参考价值，建议全文发表。 以下建议供参考： 1、图1A与图1B-D的放大倍数应一致，便于比较。 答：已经将图1A替换为较高倍数的细胞照片（见文中）。 2、图7B-D未见明显差别，图7B、7C未见文中描述的小的片状坏死灶。 答：由于图7B-D的差异不明显，现已更换为表现更为典型、差异较为明显的图片（详见文中）。 3、 既然观察了模型对照组的肿瘤转移情况（小鼠EL-4淋巴瘤细胞已知的结果），为何没有治疗组的对比观察。 答：根据原实验记录，现将对照组及治疗组的肿瘤侵袭转移情况进行了统计，并进行了对照组和治疗组的比较，具体见“结果”中的表4。在“方法”中也对相应方法学进行了补充。 4、 既然观察6周后有半数小鼠处死，建议增加瘤重的对比结果，因为卡尺测量推测的肿瘤体积可靠性有限。 答：根据原实验记录，现将6周后有半数小鼠处死时，对照组及实验组的瘤重情况统计，并进行了比较，具体见“结果”中的表3。在“方法”中也对相应方法学进行了补充。 5、 关于B7-1基因的抗肿瘤效应已有很多文章涉及，MIP-1α基因也见报道。建议讨论中增加与已有研究结果的对比分析。 答：结合相关文献，“讨论”中增加了本实验结果与其他相关文献的对比、讨论内容，详细见讨论中。 二、格式修改 请参阅专家意见修改，并下载附件论文书写模板，参阅修改。请用红色字修改，以示我修改处。为提高本杂志的影响因子等指标，参考文献请尽量多引用《中国比较医学杂志》和《中国实验动物学报》的文章。感谢支持！改好后务必上传修改稿，不要在其它地方粘贴附件。 答：①已严格按照专家意见进行了修改 (见红色标示)。 ②已按照附件论文模板进行了整篇文章的修订。 ③参考文献中增加了《中国比较医学杂志》的文章，共4篇。 转染MIP-1α和B7-1基因增强小鼠抗淋巴瘤效应的初步研究 刘伟，余英豪 （南京军区福州总医院病理科，福州，福建350025） 【摘要】 目的 观察转染趋化因子MIP-1α和共刺激分子B7-1基因增强小鼠抗淋巴瘤的效应。方法 将MIP-1α和B7-1基因慢病毒重组载体转染小鼠EL-4淋巴瘤细胞，应用RT-PCR检测MIP-1α和B7-1基因mRNA表达，Western blot法检测MIP-1α和B7-1蛋白表达；转基因EL-4细胞注入小鼠右腋皮下，观察成瘤情况；灭活的转基因EL-4细胞注入成瘤小鼠体内，观察其增强小鼠抗淋巴瘤效应。结果RT-PCR检测发现EL-4/MIP-1α+B7-1细胞内有MIP-1α及B7-1mRNA表达，Western blot显示MIP-1α及B7-1蛋白表达；MIP-1α组、B7-1组较对照组成瘤时间延长，成瘤率降低，肿瘤平均体积较小，而联合组成瘤性消失；MIP-1α和B7-1治疗组的肿瘤平均体积、重量及肿瘤器官转移率明显小于对照组（P＜0.05），而联合组的肿瘤平均体积及重量明显小于MIP-1α和B7-1组（P＜0.05），而且联合组小鼠平均生存期，均较单基因组、对照组明显延长（P＜0.05）。结论 转染MIP-1α和B7-1基因能够明显增强小鼠机体抗淋巴瘤效应，明显延长荷瘤小鼠的平均生存期，为淋巴瘤的基因治疗提供了新的思路。 【关键词】 慢病毒载体；EL-4细胞；MIP-1α基因；B7-1基因；淋巴瘤 【中图分类号】R733.1 【文献标识码】 【文章标号】 [基金项目] 南京军区医学科学技术研究“十一五”计划课题(编号：07Z034);福建省自然科学基金(编号：2010J01221)资助。 [作者简介] 刘伟（1985-），男，医师，硕士，研究方向：肿瘤病理及淋巴瘤的基因治疗，E-mail: liuweiyisong@163.com。 [通讯作者] 余英豪（1956-），男，主任医师，硕士生导师，研究方向：肿瘤病理及淋巴瘤的基因治疗。E-mail: yuyinghao0808@126.com。 Preliminary Study of MIP-1α and B7-1 gene Transfection Enhances Antitumor Effection on Mouse Lymphoma LIU Wei, YU Yin