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2.2.1动物细胞培养与核移植技术-
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植物细胞工程常用的技术手段有哪些?
动物细胞常用的技术手段呢?
植物组织培养, 植物体细胞杂交
动物细胞培养
动物细胞融合
生产单克隆抗体
动物细胞核移植
动物细胞工程常用技术
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资料分析
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想怎样才能获得大量的健康的皮肤?
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一、动物细胞培养:
1、概念
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。是其他动物细胞工程技术的基础
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2.动物细胞的培养过程
单个细胞
1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?
增殖能力强,分裂旺盛,容易培养。
2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞分散?
分散的单个细胞容易摄取所需的营养,排出代谢废物;
3、用胃蛋白酶可以代替胰蛋白酶吗?
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4。
4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
长时间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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2、动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
细胞悬浮液
胰蛋白酶
10代细胞
原代培养
传代培养
无限传代
单个细胞
加培养液
这些组织或器官
上的细胞生命力
旺盛,分裂能力强
细胞贴壁生长
接触抑制
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接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,
细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞
的接触抑制。
部分细胞突变,获得不死性,向癌细胞方向发展,糖蛋白减少。
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相关概念
① :悬液中分散的细胞贴附在 瓶壁上。
② :当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞_________ 的现象。
③ :指动物组织消化后的初次培养。
④ :贴满瓶壁的细胞,出现 后,需要重新用________ 等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖 的培养过程。
答案
停止分裂
增殖
接触抑制
胰蛋白酶
填一填
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培养条件
①无菌、无毒的环境:培养液中添加一定量的 ,并定期________
,以清除 ,防止对细胞自身造成危害。
抗生素
答案
②营养
无机物:无机盐、微量元素
有机物:糖、 、 和天然成分: 等
③温度和pH
温度:哺乳动物多以 为宜
pH:多数细胞适宜pH为_______
④气体环境
O2:细胞代谢所必需
CO2:_______________
更换培养
液
代谢产物
氨基酸
促生长因子
血清、血浆
36.5±0.5 ℃
7.2~7.4
维持培养液的pH
加入的气体是( )的混合气体
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3、动物细胞培养技术应用
(1)、大规模培养
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