大熊猫精液品质评价方法.pdfVIP

动物医学进展，2008，29(1)：104—106 Progress in Veterinary Medicine 大熊猫精液品质评价方法 周应敏，李德生，王鹏彦，张和民，汤纯香，周 强 (中国保护大熊猫研究中心．四川汶川 623006) 摘 要：大熊猫精液质量的评估对人工繁殖大熊猫具有重要意义。目前，人工圈养繁殖的大熊猫主要采 用精子运动能力、形态特征、质膜完整性、顶体完整性、与卵子的结合能力等指标来评定大熊猫的精子功能状 态。该文对上述指标的评估方法进行了综述，并对目前采用的大熊猫精液质量评价方法中存在的不足进行 了分析，对其发展前景进行了展望。 关键词：大熊猫；精子质量；评价；人工授精 中图分类号：S8l4，4 文献标识码：B 文章编号：1007—5038(2008)01-0104—03 人工授精技术对挽救濒危动物有着极其重要的 是在光学技术的基础上结合计算机图像识别、运动 意义。大熊猫繁殖期存在配种难的问题，从20世纪 图像处理技术发展起来的精子运动能力的综合分析 60年代起人工授精作为辅助生殖技术引人大熊猫 方法。这种检测方法提高了检测结果的客观性、准 繁殖中，从而解决了这一难题。起初人工授精成功 确性，并且快速。 率极其低下，曾数年人工授精却没有产下一仔，从而 2 大熊猫精子活力 引起研究人员对精液质量的关注。对大熊猫精液质 对精子活力的评估是提高人工授精成功率的有 量的评估，包括精液的常规检查，如精液量、精子密 力措施。精子活力是指有向前运动能力的精子百分 度、精子运动力和形态等方面。随着精子检测技术 率。只有前向运动的精子才有可能到达受精的位 的快速发展，对精子质量检测的内容也进一步拓 置，如果精子的活力过低，能够成功到达受精部位的 展，从常规检查发展到精子生化、免疫等方面的检 精子数量势必受到影响。有研究表明，在人类宫腔 测，染色技术也从普通损伤性染色发展到活体染 内注射的前向运动精子总数≤20×10 时，妊娠率明 色，从精子整体染色发展到顶体染色和 DNA染色 显降低[J 。国外对其他动物的研究也表明精子的 技术口]，从精子超微结构的检测发展到功能的检 活力与受精率之间存在显著关系 ]。 测 ]，这些新技术已在哺乳动物精子质量检测中得 在普通实验室，精子活力一般情况下采用在普 到广泛的运用 _6l_。但这些新技术的运用往往需要 通光学显微镜下直接观察记录。这种活力的评定方 昂贵的仪器设备，因此，在大熊猫人工授精中运用较 法易受主观因素的影响，-带有一定的人为误差，但操 少。本文就目前人工圈养条件下，对大熊猫精液进 作简便快捷，在实际工作中十分适用。在有条件的 行质量评估的内容及方法进行阐述。 实验室，精子的活力也可采用CASA、精子质量分析 1 大熊猫精液体积、精子密度和形态 仪(sperm quality analyzer，SQA)来分析。 人工授精前须对大熊猫精液的体积、密度进行 3 大熊猫精子顶体完整性评估 评估。精液体积直接采用微量移液器测定，对大熊 顶体评估也是人工授精前精子质量检查的重要 猫精子形态的评价可采用光学显微镜直接观察，这 内容。顶体位于精子前端，是环绕头部的一个帽状 两项评估都简单易行，不需特殊的设备。精子密度 结构，把精子头部分为顶体部和顶体后部，大熊猫顶 的测定采用血细胞计数板 ]，在光学显微镜下直接 体内有很多水解酶，包括受精过程必须的透明质酸 计数，这种方法是一般实验室常用的方法，但精确度 酶和顶体素。在受精之前，具有完整顶体的精子是 不高。条件较