【生殖医学资料】黄国宁-实验室环境与生殖风险.pptVIP

——Takenaka M, et al, Proc Natl Acad Sci 2007 光线损伤胚胎的机理（氧毒性） 氧离子→分子氧→O2ˉ（显著降低O2） → → → → H2O2 → → → → →过氧化物→Fe、Cu →OH0 （强氧化剂、强毒性）→细胞损伤 Catt and Henman, 2000 氧化物破坏→培养基中氧浓度增加 过氧化物歧化酶 过氧化物酶 牛胚胎操作过程中，体视显微镜加绿色滤光片与不加滤光片虽然不影响胚胎的发育，但用无滤光片体视显微镜操作的胚胎可以检测到诱导型应激蛋白的表达 比较光照对鼠胚的影响，A示 受精卵暴露于白色荧光（1200lx）15分钟后形成的囊胚，细胞碎片增多，凋亡小体增加（TUNEL assay），B示 没有暴露于光照的囊胚 ——Manami Takenaka, et al, 2007 尽量缩短配子、胚胎暴露显微镜下观察或操作时间 但使实验室过暗是不安全的也是没有必要的 相对于胚胎而言，光线影响的阈值不明确 使用红色滤光片 日光灯？ 白炽灯？ 小结 IVF实验室空气质量影响胚胎发育，降低其发育潜能，通过安装空气净化系统，可以改善IVF实验室空气质量，提高胚胎质量和妊娠结局。 IVF实验室温度变化影响卵子纺锤体、胚胎细胞器以及相关基因 表达，而影响其发育潜能，增加生殖风险. IVF实验室湿度可能通过影响培养液渗透压,影响胚胎发育潜能。 IVF实验室光照强度也会影响胚胎发育潜能，甚至改变其表观遗传学，增加胎儿的安全风险。 实验室环境对生殖风险的影响需要进一步的研究。 改善IVF室内的空气质量，可能改善IVF治疗结局。 * VOCs对IVF的影响 研究使用净化器前后IVF妊娠结局的变化 P1（Period1）：使用净化器前（未测量VOCs) P2：使用净化器后（VOCs在0~0.8ppm） P3：使用改进的净化器，VOCs维持0.0ppm ——Cottin V, et al, ESHRE，2011，P-155 结果： 阶段2(P2)空气中测出含有二甲苯和丙苯成分； OPU周期： 组间受精率无显著性差异； P1与P2妊娠率无差异 P3期间生化妊娠率显著高于 P1+P2（33.8% vs 19.8%；p0.05); P3临床妊娠率显著高于 P1+P2 （p0.01)。 FET周期三组间无差异。 结论：VOCs（二甲苯、丙苯）影响新鲜周期的临床妊娠率。 ——Cottin V, et al, ESHRE，2011，P-155 不同空气净化装置处理后IVF实验室空气质量 First sampling: 活性炭滤膜更换前 Second sampling: 活性炭滤膜更换后 Third sampling:活性炭滤膜+ Landson? 系统 —— Rabea Youcef Khoudja et al. J Assist Reprod Genet. 2013 TT1: 活性炭滤膜更换前；TT2活性炭滤膜更换后；TT3:活性炭滤膜+ Landson? 系统 IVF实验室空气改善可以提高胚胎质量，妊娠及种植率。 —— Rabea Youcef Khoudja et al. J Assist Reprod Genet. 2013 千级 配子/胚胎操作区的空气质量(1) 千级 配子/胚胎操作区的空气质量(2) 净化后空气中VOCs含量 二氧化氮 氨 臭氧 甲醛 苯 甲苯 二甲苯 空气净化（-） 0.030 0.047 0.03 0.025 0.025 0.005 0.1 空气净化（+） 0.017 0.029 0.03 0.017 0.025 0.005 0.1 ——重庆市妇幼保健院，2009 单位：mg/m3 二、温度 可能影响MII卵纺锤体 可能影响胚胎相关基因的表达 可能影响胚胎代谢 胚胎发育潜能 IVF实验室一般情况下：每间隔3分钟，工作3分钟 传统的温度湿度控制系统 IVF实验室不同时间温度及湿度 湿度 温度 —— CQ-RGI 2013 平均温度：24.3 ℃；平均湿度：59.2 实验室温度设定24 ℃时不同位置温度和湿度 进风口 风速和温度 距地面1m 风速和温度 回风口 风速和温度 实验室温度分别设置为20℃和26℃ 使用实施温度测定探针分别测定培养箱、显微镜热台表 面以及载玻片加热器等设备的温度 5min/次，连续测量12h 设备名称 20℃ 26℃ Paired difference P value 尼康倒置显微镜 34.30±0.02 36.16±0.07 1.86±0.07 ＜0.0001 尼康荧光显微镜3,4 35.15±1.13 36.90±0.21 2.05±0.17 ＜0.0001 尼康体视显微镜2,5 33.08±0.79