SMAD7基因非编码区遗传多态对云南汉族人群结直肠癌患病的影响.docVIP

　　SMAD7基因非编码区遗传多态对云南汉族人群结直肠癌患病的影响 1、引言 1.1背景 结直肠癌（colorectal cancer, CRC)是目前世界上最常见的三大恶性肿瘤之一，并且在世界范围内它的发生任然呈现稳定增长的趋势。全球结直肠癌患病人数估计有280万，每年新增病例约有100万，并且有超过50万例患者死于结直肠癌，发病率居于恶性肿瘤第三（仅次于肺癌、乳腺癌），死亡率处于第四位过去，中国是传统的结直肠癌低发国家，但近年来，随着人们生活方式和饮食习惯的改变，结直肠癌发病率和死亡率均快速上升，成为严重威胁人群生命健康的公共卫生为题我国卫生部2004年颁发的《中国癌症预防与控制规划纲要(2004一 2010)》中指出，结直肠癌、肺癌及乳腺癌等发达国家高发癌症在我国的发病迅速上升，与肝癌、食管癌、胃癌、宫颈癌和鼻咽癌等传统高发癌症并列为我国目前重点防治的8大恶性肿瘤，这8种恶性肿瘤死亡约占总死亡人数的80%以上结直肠癌的发病机制尚未完全阐明，但大量病因学研究已经表明，结直肠癌的发生发展是一个多阶段、多步骤、多基因参与的过程，是由环境因素和遗传因素共同作用的结果⑷。尽管研究已经表明环境因素对于结直肠癌发病的重要性，然而相同环境因素下却只有部分个体发生肿瘤，说明环境因素是结直肠癌发生的始动因素，而个体的遗传特征是结直肠癌易感性的决定因素。因此，对结直肠癌遗传易感因素进行系统的研究，寻找结直肠癌高风险基因或位点，对于实现结直肠癌的有效预防和早期诊断具有重大的实际意义。 .. 1.2结直肠癌的临床症状及筛查手段 早期结直肠癌症状不明显，可无症状或仅隐约不适，消化不良，隐血等，随着癌肿进展，症状逐渐明显，表现为大便习惯改变，便血，腹痛，腹块，肠梗阻以及发热，贫血和消瘦等全身毒性症状，因肿瘤浸润转移尚可引起相应器官的改变，结直肠癌依其原发部位不同而呈现不同的临床征象和体征[5]。 1.2.1右半结肠癌的临床表现 (1)腹痛。右半结肠癌有70%?80%患者有腹痛，常为隐痛，多由肿块侵及肠壁所致，癌肿馈荡继发感染可致局部压痛和全身毒血症等。 (2)贫血。因癌灶的坏死、脱落、慢性失血，50%的患者有面色苍白、乏力等贫血表现。 (3)腹部包块。右半结肠肠腔宽大，原发癌待发现时常已增大甚大，以淸痕肿块多见，许多患者可于右腹部扣及肿块，除非癌肿直接累及回盲瓣，一般较少出现肠梗阻。 2实验材料及方法 2.1主要仪器及耗材 (1)超低温冰箱：美国Harris公司 (2)冰箱和冰柜：青岛海尔公司 (3)冷冻离心机Centrifuge5804R：德国Eppendorf公司 (4)台式离心机80-2B:上海安亭科学仪器厂 (5)PCR扩增仪(PE9700)：美国ABI公司 (6)电泳仪：美国BIO-RAD公司 (7)Electro-4 Gel Tank电泳槽：英国HYBAID公司 (8)数码凝胶成像系统：英国SyngeneGene Genius公司 (9)电子恒温箱：德国MEMMERT公司 (10)电子恒温水浴锅MEMMERTmol/L Tris - HCl； 1 mniol/L EDTA; 0.1 mmol/L NaCL (3)10%SDS： SDS lOg，加ddhO定容至l00ral，室温保存备用 (4)蛋白酶K:德国MerckKgaA公司 (5)TE缓冲液：10 mmol/L Tris - Hcl； 1 mmol/L EDTA (6)氯仿：异戊醇(24:1)： 240inl氯仿；10ml好戊醇混匀后，室温保存 (7)DNA 保存液（1XTE): 12. 12g Tris-HCl； 37. 24g EDTA,力 nddH20 定容至 lOOOml,灭菌后室温保存备用 (8)琼脂糖：BIO)：大连TaKaRa公司 (18)PCR引物（l0mM)：上海生工 (19)50bp DNA Ladder：大连TaKaRa公司 3讨论..........24 3.1结直肠癌病例组与对照组SNP位点基因型........24 3.1.1基因5个SNPs位点与结直肠癌相关性分析结果........24 3.1.2SM4D7基因5个SNPs位点与结肠癌........25 3.2结直肠癌病例组和对照组m4Z)7基因5个SNPs........31 3.2.15M4D7基因5个SNPs位点与结直肠癌相关性分析结果........31 3.2.2基因5个SNPs位点与结肠癌........36 3.3结直肠癌病例组与对照组SM4D7基因.........47 4讨论........50 4.1基因5个SNPs位点与结直肠癌的关联性........50 4.2SMAD7基因5个SNPs位点单倍型与结直肠癌关联性........53 4.3小结........54 4.4展望.