依曲替酸对寻常型银屑病皮肤IFNγ、IL4mRNA表达的影响.docVIP

　　依曲替酸对寻常型银屑病皮肤IFNγ、IL4 mRNA表达的影响 ：牛新武，曹伟，冯捷，马慧群，袁景奕 【摘要】 目的 探讨依曲替酸 治疗 寻常型银屑病(psoriatic vulgaris, PV)的作用机制。方法 观察依曲替酸对30例PV患者的临床疗效，并用原位杂交技术对患者治疗前后皮损中Th1型细胞因子干扰素γ(IFNγ)和Th2型细胞因子(IL4)mRNA进行检测。结果 依曲替酸能改善PV患者病情，有效率76.67%。IFNγ、IL4 mRNA主要在真皮表皮交界处的淋巴细胞胞质中表达，IFNγ mRNA的表达治疗前(45.61±9.96)明显高于正常对照(4.40±1.20，Plt;0.01)，治疗后(16.82±7.20)明显下降(Plt;0.01)。IL4 mRNA表达无显著变化。结论 依曲替酸治疗PV的作用机制可能与其抑制皮肤中IFNγ mRNA的表达及调节Th平衡有关。 【关键词】 寻常型银屑病;维A酸;依曲替酸;Th细胞 　　ABSTRACT: Objective To explore the therapeutic mechanism of acitretin for psoriatic vulgaris (PV). Methods The clinical effects of acitretin on 30 patients RNA/IL4 mRNA expression in PV patients skin lesions before and after the treatment ethod. Results The skin inflammation of PV patients proved RNA/IL4 mRNA phocytes at dermoepidermal junction. Prior to the treatment, the expression of IFNγ mRNA (4.40±1.20) ent, the expression of IFNγ mRNA (16.82±7.20) RNA did not change significantly. Conclusion The therapeutic effects of acitretin may be associated RNA expression and regulation of dermal Th balance. 　　KEY RNA表达变化，从而了解依曲替酸在治疗银屑病中，是否影响了Th的平衡。 　 　1 材料与方法 　　1.1 病例资料 收集2007年1月至2008年12月我院皮肤科门诊诊断为中重度寻常型银屑病的患者(银屑病范围及严重程度评分PASIgt;7)30例，其中男13例，女17例，年龄20～69岁，平均35.95岁，病程3月～21年。入选标准：①临床及组织病理确诊为寻常型银屑病。②3月内未使用维A酸类药物、糖皮质激素及免疫调节剂等系统治疗，3月内无皮损局部用药;③入选病例签署知情同意书。排除标准：①有严重心、肝、肾疾患，糖尿病、高血压、高血脂、恶性肿瘤患者。②育龄期妇女3年内准备妊娠者、孕妇及哺乳期妇女。对照组正常皮肤来自我院外科，共13例(男8例、女5例)，年龄18～58岁。 　　1.2 治疗方法 依曲替酸(即阿维A，重庆华邦制药)10mg/次，2次/日，餐后口服，共8周。治疗初始、4周末、8周末检查血尿常规、肝功、血脂。治疗前后各进行PASI评分1次。 　　1.3 标本取材 银屑病患者经阿维A治疗前和治疗8周后皮损及外科手术切取的新鲜正常皮肤，40g/L多聚甲醛固定，石蜡包埋。 　　1.4 原位杂交法检测IFNγ mRNA、IL4 mRNA 原位杂交试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。人IFNγ靶基因mRNA序列为：5′TACGTCTCG 　　ACTTTTCGGTTCTATATTGAA3′;5′AAGAC 　　AGTGAGAGGAGAAAGGTTAAGAAGT3′; 5′ 　　ACGAGCCGCTGGAGCTTTGTCGTAGACTGA3′。 　　IL4靶基因的mRNA序列为：5′GACAAGAAGGACGATCGTACACGGCCGTTG3′;5′CTCTTTATAAGTTTCACAAGCTCGACTTAT3′。所有试剂的配制均需要使用焦磷酸二乙酯(sodium acid pyrophosphate, DEPC)，以防RNA酶对mRNA的降解作用。6μm厚石蜡切片置于经多聚赖氨酸处理过的玻片上，脱蜡水化后用30mL/L双氧水孵育10min，DEPC水洗6min;胃蛋白酶消化30min，原位杂交用PBS洗