Hsp90抑制剂槚如酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,侵袭,迁移的影响.PDF

J South Med Univ, 2015, 35(3): 355-359 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.03.08 ·355 · 基础研究 HspHsp9090 抑制剂抑制剂槚槚如酸对乳腺癌如酸对乳腺癌MDA-MB-MDA-MB-231231 细胞增殖细胞增殖、、侵袭侵袭、、迁迁 移的影移的影响响 李红梅，聂丽娟，霍 强，赵素容，马 涛，吴成柱，刘 浩 蚌埠医学院药学系，安徽 蚌埠 233030 摘要：目的探讨热休克蛋白90 (Hsp90) 抑制剂槚如酸对人乳腺癌MDA-MB-231 细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法 采用体外 malachite green-molybdate 显色反应和ATP- 琼脂糖凝胶结合实验检测槚如酸对Hsp90 抑制活性；MTT 法检测药物对 MDA-MB-231 增殖抑制效应；Transwell 小室法检测药物对细胞侵袭和迁移影响；免疫印迹法检测药物对相关蛋白基质金属蛋 白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP- 1）、Hsp90、热休克蛋白70（Hsp70）表达的影响。结果 槚如酸为特异性 的Hsp90抑制剂，其抑制IC50值为82.5 μmol/L。MTT 结果显示，槚如酸具有明显抑制细胞增殖的作用，且呈现浓度依赖关系，其 IC50值为29.3 μmol/L。不同浓度的槚如酸（12.5 ，25.0 ，50.0 μmol/L）处理36 h 后，与对照组相比，药物对细胞侵袭抑制率分别为： 23.6% 、56.6% 、67.0% ，P0.05。槚如酸（12.5 ，25.0 ，50.0 μmol/L）处理24 h 后，与对照组相比，药物对细胞迁移抑制率分别为： 30.0%、45.5%、77.5% ，P0.05。免疫印迹法结果显示，槚如酸随着浓度的增加，诱导MMP-9 降解越明显，而对Hsp90 和Hsp70 蛋 白表达均没有影响。结论 槚如酸能明显抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力，其机制可能是通过抑制Hsp90 ATPase 活性以 及导致下游的顾客蛋白的MMP-9表达下调有关。 关键词：槚如酸；热休克蛋白90 ；三阴性乳腺癌；抗肿瘤活性 Effect of anacardic acid, a Hsp90 inhibitor, on proliferation, invasion and migration of breast cancer MDA-MB-231 cells LI Hongmei, NIE Lijuan, HUO Qiang, ZHAO Surong, MA Tao, WU Chengzhu, LIU Hao Faculty of Pharmacy, Bengbu Medical College, Bengbu 233030, China Abstract: Objective To explore the effect of the Hsp90 inhibitor anacardic acid on cell proliferation, invasion and migration of breast cancer MDA-MB-231 cells. Methods The inhibitory effect of anacardic acid on Hsp90 was assessed with in vitro ATPase inhibition assay and ATP-sepharose binding assay. MTT assay was used to detect the growth inhibition induced by anacardic acid in MDA-MB-231 cells. Transwell assays were used to evaluate MDA-MB-231 cell invasion and migration. Western blotting was performed to assess the effect of anacardic acid in triggering the degradation of MMP-9, TIMP-1, Hsp90, and Hsp70. Results Anacardic