培养基适用性检查_附件.docVIP

微生物计数培养基适用性检查记录 1.培养基名称： 批号： 2.对照培养基批号： 对照培养基生产厂家： 3.配制日期： 年 月 日 实验日期： 年 月 日 一、方法依据 ：中国药典2010年版。 二、菌液制备： □（1）大肠埃希菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液 10倍递稀释 □（2）金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液 10倍递稀释 □（3）枯草芽孢杆菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液 10倍递稀释 □（4）白色念珠菌新鲜改良马丁培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液 10倍递稀释 □（5）黑曲霉新鲜改良马丁培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液 10倍递稀释 需要的菌种在□内划“√ ” 三、每ml菌液含菌量的计数测定。 测定方法：取稀释后的菌液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15-20ml，温度不超过45℃ 的溶化的营养琼脂培养基（细菌类别计数选用该培养基）或玟瑰红钠琼脂培养基（霉菌、酵母菌类别计数选用该培养基），混匀，凝固，倒置培养。每稀释级每种培养基至少制备2个平板。细菌类别培养温度30℃～35℃；霉菌、酵母菌类别培养温度为23℃～28 ℃。细菌类别培养3天，霉菌类别培养5天。 四、结果判断 若被检培养基上的菌落平均不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致，则判断该培养基的适用性检查符合规定。 菌种类型 被检培养基 对照培养基 A/B (%) 被检与对照培养基菌落形态 大肠埃希菌 皿1 皿2 平均A 皿1 皿2 平均B 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 结果判断 复核人： 微生物计数培养基适用性检查记录 验证目的： 细菌、霉菌及酵母菌计数用培养基应进行培养基的适应性检查，本次验证的目的是为了确证营养琼脂培养基和玟瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌测定。 参照标准：《2010年版中国药典》 验证项目：营养琼脂培养基和玟瑰红钠琼脂培养基 验证所用培养基： 名 称 批 号 生产厂家 营养琼脂培养基 121220 北京三药科技开发公司 玟瑰红钠琼脂培养基 130107 北京三药科技开发公司 营养琼脂对照培养基 135003-201103 中国药品生物制品鉴定所 玟瑰红钠琼脂对照培基 135005-201103 中国药品生物制品鉴定所 配制日期：2013年3月1 日 实验日期2013年3月20日 5、菌液制备： 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基斜面上。培养24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面，培养24小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1ml含菌数为50-100cfu的菌悬液。 适用性检查： 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50-100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，混匀，凝固，每株实验平行制备2个平皿，另1平皿不接种菌作为空白对照，置30-35℃培养48小时，计数；取白色念珠菌50-100 cfu，立即倾注玟瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，每株实验菌平行制备2个平皿，另1平皿不接种菌作为空白对照，置23-28℃培养72小时，计数。同时，用相应对照培养基替代被检培养基同步进行上述试验。 7、结果记录： 验证菌株 皿号 供试培养基组Cfu/ml 对照培养基组Cfu/ml 回收率%应≥70% 菌落形态与大小 大肠埃希菌（培养2天计数） 1 78 82 80 合格 2 68 84 76 平均 73 83 78 金黄色葡萄球菌（培养2天计数） 1 80 76 78 合格