HRP催化反应机制的的分析研究及其动力学参数的测定.pdfVIP

HRP催化反应机制的研究及其动力学参数的测定 摘要：酶联免疫吸附分析(ELISA)是目前各种传染病临床检测的常规方法。辣根过 ELISA，但通常被视为单底物反应处理，有关HRP催化双底物反应的研究很少见到报道， 反应机制进行了理论分析和实验论证；探索了HRP催化H202氧化还原性罗丹明B 反应体系，应用于酶联免疫吸附分析；将HRP催化双底物反应动力学方程与朗伯．比耳 定律相结合，给出了HRP催化动力学光度法的理论依据；确定了HRP催化双底物反应 机制，测定了HRP催化动力学参数，为固定化酶催化动力学的研究奠定了基础。 生物酶的应用对绿色化学具有重大意义，但生物酶是一种十分昂贵的试剂，固定化 酶可以大大降低生产成本。酶的固定化是利用一些化学方法将酶固定在载体上，使酶既 能保持原有的活性，而又能不妨碍被分析物的自由扩散。固定化酶具有热稳性高、可重 复使用、不需要在反应后进行催化物质与反应物分离等优点，在工农业生产、临床治疗 以及基础理论研究应用前景广阔。本文初步研究了利用自组装技术固定HRP的新方法。 本论文主要在以下三个方面得到了较为满意的结果。 1．HRP催化H202氧化OPD体系的动力学研究 行了动力学研究，在pH4．75，温度为22℃时，确定了该反应体系H202的最佳浓度范 Line