无花果多提取技术研究.doc

吉林省高等教育自学考试 生物制药专业毕业设计 设计项目：无花果多糖提取技术研究 完成时间： 年 月 设计作者： 准考证号： 工作单位： 联系电话： 吉林大学生命科学院印制 摘要 本文以无花果取汁后的残渣为原料，探讨浸提次数、时间、料液比和温度对多糖得率的影响，在单因素试验的基础上，通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明：在试验范围内，最佳提取温度为100℃，在此温度下提取次数对多糖提取率影响最大，其次为料液比，提取时间的影响最小。无花果多糖提取的最优条件为提取温度100℃，料液比1：12，浸提2次，每次浸提3h，其水溶性多糖提取率达8.52％。 关键词：无花果；多糖；提取 目录 前言……………………………………………………4 材料和方法……………………………………………5 结果与分析……………………………………………8 结论与讨论……………………………………………13 参考文献………………………………………………14 致谢……………………………………………………15 前言 无花果是一种桑科榕属植物无花果（Ficus carica．L）的干燥花托，具有广泛的营养价值和药用价值，不但香甜可口，而且具有润肺止咳、健胃清肠、消肿解毒、增强机体免疫功能、抑制多种肿瘤的功效，近年来无花果抗肿瘤特性尤其受到人们的重视［1］。目前国内外在无花果抗癌方面的研究十分活跃。 无花果多糖是无花果的重要的功能因子，戴伟娟等（2002）研究发现，无花果多糖不仅对正常小鼠的免疫功能有增强作用，而且对荷瘤小鼠的免疫功能抑制状态有恢复作用，推测无花果多糖的抗瘤机制可能与激活机体免疫系统有关。 无花果残渣是无花果取汁后的下脚料，其中含有丰富多糖成分，现在常被废弃于环境中。目前对适合工业化生产的无花果多糖提取技术研究不多，以无花果残渣为原料提取无花果多糖更未见报道。本文在充分调查的基础上，针对我国无花果加工企业对无花果残渣利用现状，研究了无花果残渣中多糖的提取技术，为无花果综合加工、延长农业产业链和保护环境提供依据。 1材料与方法 1.1试验材料、试剂与设备 １．１．１试验材料 无花果残渣 江苏省丰县中研无花果有限责任公司 １．１．２试剂 正丁醇，三氯甲烷，95％乙醇，三氯乙酸。以上试剂均为分析纯试剂 １．１．３设备 HH恒温水浴锅 江苏中大仪器厂；GFB高速万能粉碎机 北京长风仪器仪表公司；RE—52A旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂；LD5 —2A医用离心机心机 北京医用设备公司；快混匀器 中外合资深圳天南海北公司；冷冻干燥器，DTS 050型真空冷冻干燥实验机。 1.2方法 1.2.1提取工艺 无花果残渣→超临界CO2去脂→热水浸提→除蛋白→浓缩→乙醇沉淀→去色→冷冻干燥→无花果多糖 1.2.2试验方法 1.2.2.1去脂对多糖提取率的影响 取20g无花果残渣和20g无花果残渣超临界CO2萃取后的萃取物在干燥皿中贮放3d后，取出，分别加18倍的双蒸水，在沸水浴中提取2h，离心，沉淀再用双蒸水浸泡并离心一次，合并两次上清液，定容至250ml测定多糖含量。 1.2.2.2温度对多糖提取率的影响 分别秤取无花果残渣粉20g，加18倍水，浸提时间6h，提取1次，研究在不同提取温度（20、40、60、80、100℃）下多糖的得率。 1.2.2.3提取时间对提取率的影响 秤取无花果残渣粉20g，加水900ml，提取温度100℃，提取1次，研究在不同提取时间（10、30、60、90、120、180、210、270min）时多糖的得率。 1.2.2.4加水倍数对提取率的影响 分别称取无花果残渣粉20g，在提取温度100℃，提取时间120min时，研究不同加水倍数（3、9、12、15、18和100倍）时多糖提取率。 1.2.2.5提取次数对提取率的影响 分别称取无花果残渣粉20g，在提取温度100℃，提取时间3h，加水倍数为12倍时，研究不同提取次数（1，2，3，4，5次）对多糖提取率的影响。 1.2.2.6正交试验 根据单因素试验的结果，确定正交试验的因素水平，研究无花果多糖的最优提取工艺。 1.2.2.7除蛋白方法的确定 比较两种除蛋白方法（Sevage法，三氯醋酸法）对无花果提取液中蛋白质去除效果。Sevage法是在多糖提取液中加入氯仿：戊醇（或正丁醇）＝5：1的混合溶剂，混合物剧烈振摇20～30min，蛋白质与氯仿—戊醇（或正丁醇）生成凝胶物，离心，分去水层和溶剂曾交界处的变性蛋向质。二氯醋酸法是在冰浴中搅拌的情况下缓缓于提取液中加入15％～30％二氯醋酸，直至溶液不再继续浑浊。在低漏下（4℃）放置4h。离心除去沉淀即得无蛋白质的多糖提取液。 1.2.2.8多糖测定方法 硫酸一苯酚法[5]。 2结果与分析 2.