人红细胞乳酸脱氢酶的提纯及其性质研究!.PDF

! 临床检验杂志 ##$ 年第 $% 卷第 $ 期 ’()*+* ,-./)01 -2 1()(301 405-/06-/7 83(*)3* 9 ##$9 :-1 ; $% 9 - ; $ 文章编号： A B $##$ = ?!@ ##$ #$ = ###! = #! 人红细胞乳酸脱氢酶的提纯及其性质研究! 茅凌翔!!，孟泽，史利宁 （南京军区南京总医院检验科，南京 $###） A B E 摘要 C 目的 研制乳酸脱氢酶的标准品，从人红细胞中提取了乳酸脱氢酶 4D 并对其特性进行了研究。方法 用经过改进的 方法，包括完全溶解红细胞，羟磷灰石处理，硫酸铵沉淀， 、 、 和 亲和层析。 F = 8*G’0H*I J# 8*G’0H*I K$## J L = MFN = 8*G’0/-+* 结果 该提制品 A B 比活性达 蛋白，几乎不含其它杂酶 测不到 、 、 、 、 、 、 活性 。聚丙烯酰 4D $?O ; # PQR S M4T M8T U KKT ’V M4N MW7 A B 胺凝胶电泳 自然凝胶系统 酶染色显示 、 区带，蛋白质染色显示与酶相应的区带。 条件下，正向反应中，对底物 4D 4D OX 4Y $ 乳酸和 MD 的米氏常数A UWB 分别为 $; #!# 和 # ; $% WW-1R 4；逆向反应中，对底物丙酮酸和 MDZ 的 UW 分别为 # ; $$% 和 # ; #O% WW-1R 4。结论 提纯的 4D 其催化性质和人混合血清 4D 非常相似，本研究为今后进一步研制 4D 测定用参考品建立了基础。 关键词：乳酸脱氢酶；红细胞；提纯；动力学性质 中图分类号： ； 文献标识码： [!!? ; $ M 血清中乳酸脱氢酶A 4DB 常用于心肌梗死、肝病 A ’*W-17+06*B 。用磷酸盐缓冲液A $# WW-1R 4 GZ? ; dB 透 和某些恶性肿瘤的辅助诊断。中华医学会检验学会 析，加入 羟磷灰石，室温搅拌 ， O## W1 O ’ $ ### /R W() A B 根据 法提出了我国 测定的推荐方 离心 。去上清，沉淀用 ，