日本血吸虫不同虫期蛋白组分的抗原特性的分析研究.pdfVIP

日本血吸虫不同虫期蛋白组分的抗原特性研究 中文摘要 中文摘要 目的研究日本血吸虫(＆办括11沁D聊以．，印D玎fc“聊)不同期虫体经化学裂解所获 得的蛋白组分及其抗原特性，为筛选出对于血吸虫病的流行病学调查研究、预防 及诊治具有应用价值的抗原分子提供理论依据。探寻酶消化法收集纯化虫卵的适 宜条件，使所获虫卵纯度高，结构相对完整，以便于进一步对其进行生物学特性 的研究。 方法 以低温(4℃)处理雌雄虫减弱其动力方法分离雌、雄虫，以反复冻融 (．30℃)方法处理雌虫尽可能除去其体内的虫卵，用化学裂解的方法制备日本血 吸虫尾蚴、成虫(雌虫和雄虫)以及虫卵中的可溶性蛋白抗原，用十二烷基磺酸 钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDs)对不同期虫体蛋白组分的相对分子量大小 及分布范围进行分析；以感染后不同时间的兔血清和免疫印迹试验(Westem blottin曲方法，对不同期虫体蛋白组分的抗原特性进行免疫分析：利用反复过筛结 合胰酶消化后离心沉淀纯化收集血吸虫卵，并和漂浮法纯化虫卵进行比较分析。 ·结果 (1)日本血吸虫的不同虫期蛋白组分：虫卵52条带，其涉及的分子量 35．1kD区间处的蛋白分子含量极为丰富；其次是雄虫48条带，其分子量分布范围 D～35．1kD、 雌虫40条带，其分子量主要分布范围分别为25．6l①～27．6kD、27．8k 12ll(D、78．1∞、66．8姬、55．6如、36．6∞。 33．3kD分子印迹反应也是逐步增强；虫卵SEA出现的免疫反应的分子为109．5kD、 105。Ol【D、78．1～88．7如、68．9kD、36．6妨、27．3l【D，量多且逐步增强。 (3_)酶消化法在适宜条件(37℃、O．25％胰酶、适当振摇)下，所收集纯化的 虫卵结构完整，得率高，纯度可达99％以上。 结论 血吸虫虫体用化学裂解所获得的可溶性蛋白经SDS．PAGE显示：不同 日本血吸虫不同虫期蛋白组分的抗原特性研究 中文摘要 虫期、不同性别的虫体，其蛋白组分具有差异性；免疫印迹结果表明：日本血吸 27．3kD可能具有潜在的用于诊断和防治血吸虫病的价值；酶消化法与漂浮法收集 纯化的血吸虫卵的比较结果提示：酶消化法纯化血吸虫卵效果理想，更利于人们 对血吸虫卵的特性进行深入研究。 关键词 日本血吸虫，十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印迹， 可溶性虫卵抗原，可溶性尾蚴抗原，可溶性成虫抗原，组分抗原，虫卵，酶消化。 作 者：陆祥彬 指导教师：诸葛洪祥 n onthe characteristicsof Study proteinantigen life Q1IIeremdif琵rent11工e JC忍ZSfDSD，纪臼7以矽D刃ZC铭7船art＆办括幻sD聊臼砌矽D刃fc铭垅at StageSstages Abstract To the constitllents觚dcharacteristicsof protein meir锄tigen objectiVeaIlalyze atdi疵rentlife wereobtainedCheIllical 办括泐D珊口』印D拧耙“m s协ges，砌ch by 0rderto