电凝法制作大鼠脑卒中模型的改良研究刘海朋1胡永波1张小东2.doc

电凝法制作大鼠脑卒中模型的 刘海朋1，胡永波1，张小东2，王娜3，谢鹏1 （400016重庆, 重庆医科大学附属第一医院神经内科1；637000南充，川北医学院附属医院神经内科2；430022武汉，华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科3） 对电凝法制作大鼠脑卒中Tamura法和改良电凝法进行对比评价。方法 将SD大鼠分成组：Tamura手术组，Tamura假手术组，改良手术组，改良假手术组。分别使用Tamura法和改良电凝法制作脑卒中模型术后对大鼠 与Tamura法比较，改良电凝法手术时间，术后大鼠没有出现颞下颌关节紊乱。 改良电凝法制作脑卒中模型更加简便快速，对大鼠的损伤更小，对设备和操作技术要求更低 [关键词] 电凝法；动物模型；大脑中动脉闭塞；大鼠 脑卒中动物模型是研究人类脑血管病重要的手段和方法。脑卒中动物模型的创建和改进，历来是脑血管疾病科研工作者关注和研究的热点。一种简单、稳定、可重复性好、梗死面积均一的动物模型制作方法，有助于研究人类脑血管疾病的发病机理、转归和治疗。线栓法是目前应用最广泛的造模方法，但是线栓法制作的脑卒中大鼠，个体之间梗死面积差异较大，均一性不高[1]，而且梗死面积大，死亡率高[2]。线栓模型和临床上少见的大面积、致死性，半球梗死的病人更加接近[3]。电凝法也是一种常用的造模方法，术后大鼠存活时间长，死亡率低，梗死面积较一致，均一性好，而且梗死面积相对较小，因此更加接近临床[3]。电凝法 [基金项目] 国家重点基础研究发展计划(2009CB918300) [作者简介] 刘海朋，男，河南人，在读博士，住院医师，主要从事神经内科临床科研工作。E-mail：lhp98happy@163.com Tel：02368574263 [通讯作者] 谢鹏，电话：(023E-mail：xiepengcqmu@ xiepengcqmu@ 手术过程相对比较复杂，对操作人员的技术和设备都有一定的要求，如果对电凝法进行改进，将更加有利于其推广和应用于科学研究。 实验动物 普通级SD成年雄性大鼠2只，体质量200～300g，由重庆医科大学动物实 验中心提供。大鼠适应性喂养一周，水和食物自由获得。动物房12小时明暗周期循环（07:00开始光照），室温控制为21±2）℃，湿度为60%左右。 实验分组 2大鼠依据体随机分成组，分别是Tamura手术组、Tamura假手术组、改良手术组和改良假手术组（具体数量见表1）。Tamura手术组改良手术组位于大脑下静脉（inferior cerebral vein，ICV）以下，大脑中动脉（middle cerebral artery，MCA）皮层“Y”型分支前约2 mm。大体的脑血管解剖如图1，大体的电凝部位如图2。Tamura手术组采用Tamura法[3]，改良手术组采用改良电凝法制作脑卒中模型假手术组采用相应的手术方法，但是不断MCA。 图 1 SD大鼠大脑血管解剖名称和位置 图 2 Tamura和改良电凝法MCA阻断部位和 大脑下静脉解剖位置 实验方法 Tamura法制作脑卒中模型 大鼠使用3.5 %水合氯醛麻醉，剂量为 1 ml/100g。在左侧眼和耳连线的中点做一垂直切口，约1.5 cm～2 cm长（如图3，左图）。将大鼠侧卧位放置在SXP-1C手术显微镜（上海医疗器械股份有限公司，上海）下进行显微外科手术。分离皮肤，在颞肌后上部做一切口，将颞肌从颅骨上剥离，去除部分颞肌和颧骨。使用生理盐水冷却的颅骨钻（南京便诊生物科技有限公司，南京）钻孔，并向周围扩大孔径，找到MCA进行凝断。后用吸收性明胶海绵（金陵药业股份有限公司，南京）覆盖，缝合皮肤。腹腔注射青霉素4万单位预防感染，使用HSS-1(B)恒温浴槽（成都仪器厂，成都）进行保温，直至清醒。Tamura法假手术组手术过程同上，但是不凝断MCA。 改良电凝法制作脑卒中模型 动物麻醉后，俯卧位，使用SN-3型脑 立体定位仪（NARISHIGE，日本）固定头部。在头顶正中左侧旁开0.3 cm的位置做一切口（如图3，右图），并分离皮肤。在颞肌和顶骨的交界处，用手术刀在颞肌上做一纵向切口，使用刀柄将颞肌从颅骨上剥离，并使用自制拉钩固定，暴露颞窝。为了防止热和钻头伤及硬脑膜或者大脑皮层，使用生理盐水冷却的颅骨钻在鳞状骨前部打孔，不要打穿，留有一薄层骨，使用镊子夹取出，使用小咬骨钳向前下方扩大骨窗，注意不要破坏硬脑膜。在大脑皮层表面，大概在左眼和右耳的连线上，可以看到向前外上走行的MCA。使用玻璃分针轻轻上抬大脑，使MCA暴露更加充分。使用932型电热烧灼器（上海医疗器械股份有限公司，上海），调整好温度（温度太高易灼伤