胆酸的提取方法.docVIP

胆酸的提取 称取新鲜的牛、羊胆汁，加0.1倍量固体NaOH(W/W)，加热煮沸水解16小时，放冷，盐酸酸化至刚果红试纸变蓝（PH3.5—4.0），将酸性沉淀物水洗至中性或加水煮沸成颗粒，沥干，并在50-60度烘干，得粗胆酸，收率一般在50%--65%之间。 取粗胆酸，加2%活性炭及4倍量乙醇，回流2—3小时，参热过滤。滤液回收乙醇至1/3时放出，冷却，放置数天后结晶析出，捣碎结晶离心甩虑，滤饼用少量乙醇洗涤1-3次至无腥味，再以乙醇重结晶1次得精制品，收率一般为胆汁的1.5%---3.0%，含量应在80%以上。　　本品为白色粉末；无臭，味苦。 　　本品在乙醇中易溶，在氯仿中不溶；在冰醋酸中易溶，在氢氧化钠试液中溶解。 　　熔点： 本品的熔点（附录Ⅵ C）为200 ～204℃。 　　比旋度： 取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml 中含40mg的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度为＋59.0°至＋62.0°。 鉴别(1)取本品10mg，加硫酸1ml与甲醛1滴使溶解，放置5分钟后，再加水5ml，生成蓝绿色悬浮物。 　　(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集534图）一致。 检查 　　异臭 取本品2.0g，加水100ml ，煮沸2分钟，应无臭。 氯化物 　　取本品1.0g，加冰醋酸10ml，振摇使溶解，加水稀释至100ml ，摇匀，放置10分钟，滤过，取续滤液25ml，依法检查（附录Ⅷ A），与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.02％)。 硫酸盐 　　取上述氯化物项下剩余的滤液40ml，依法检查（附录Ⅷ B），与标准硫酸钾溶液2.0ml 制成的对照液比较，不得更浓(0.05％)。 有关物质 　　取本品，加氯仿-乙醇(9:1) 制成每1ml 中含 1.0mg的溶液，作为供试品溶液；另取鹅去氧胆酸对照品，加氯仿-乙醇(9:1) 制成每1ml 中含15μg 的溶液，作为对照品溶液(1) ；再取胆石酸对照品，加氯仿-乙醇(9:1) 制成每1ml 中含1.0μg的溶液，作为对照品溶液(2) 。照薄层色谱法（附录Ⅴ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以氯仿-丙酮-冰醋酸(7:2:1) 为展开剂，展开后，晾干，于120 ℃加热30分钟，喷以20％磷钼酸的乙醇溶液，再在120 ℃加热2 ～3分钟，立即检视。供试品溶液如显与对照品溶液 (1)相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液 (1)的主斑点比较，不得深；如显其他杂质斑点，其颜色与对照品溶液(2) 所显的主斑点比较，不得更深。 其它 　　干燥失重： 取本品，在105 ℃干燥2 小时，减失重量不得过1.0 ％（附录Ⅷ L）。 　　炽灼残渣： 取本品1.0g，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣不得过0.2 ％。 　　钡盐： 取异臭项下的溶液，加盐酸2ml ，煮沸2 分钟，放冷，滤过，并用水洗涤，洗液与滤液合并使成100ml ，摇匀；取10ml，加稀硫酸1ml ，不得发生浑浊。 　　重金属： 取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录Ⅷ H第二法），含重金属不得过百万分之二十。 　　砷盐： 取本品1.0g，加水23ml溶解后，加盐酸5ml,依法检查（附录Ⅷ J第一法），应符合规定（0.0002％）。 含量测定 　　取本品约0.5g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）40ml与新沸过的冷水20ml，溶解后，加酚酞指示液2 滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加新沸过的冷水100ml ，继续滴定至终点。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于39.26mg的C24H40O4。 测定方法方法名称： 熊去氧胆酸—熊去氧胆酸的测定—中和滴定法 　　应用范围： 本方法采用中和滴定法测定熊去氧胆酸（C24H40O4）的含量。 　　本方法适用于熊去氧胆酸的测定。 　　方法原理： 取供试品适量，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）与新沸过的冷水溶解，加酚酞指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于39.26mg的C24H40O4，计算，即得。 　　试剂： 1. 水（新沸放置至室温） 　　2. 中性乙醇 　　3. 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L） 　　4. 酚酞指示液 　　5. 基准邻苯二甲酸氢钾 　　仪器设备： 　　试样制备： 1. 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L） 　　配制：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。 　　标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸