环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立.pdfVIP

农业生物技术学报，20 11 年，第19 卷，第1 期，第186~ 190 页 Journal of Agricultural Biotechnology, 2011, Vol.19, No.1, 186~ 190 技术改进 Updated Technology 环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立 * 李明云 丁文超 陈炯 史雨红 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，宁波315211 * 通讯作者，limingyun@ 要 DNA 环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification ，LAMP)技术是一种特异、灵敏、快速 的新型基因检测技术，其检测结果可以通过琼脂糖凝胶电泳观察，也可以通过加入核酸染料SYBR Green 进行肉眼 察。本研究根据对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus ，WSSV) 的结构蛋白V P26 基因序 列，设计一套引物，成功建立了针对WSSV 的LAMP 检测方法。应用该方法，在65 温育1 h 的条件下快速 扩增病毒基因组DNA ，琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带；在反应体系中添加SYBR Green