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第 卷第 期 水产学报 年 月 文章编号 技术对乌鳢性别差异标记的初步筛选 刘改艳 陈昆慈 郑光明 朱新平 赵建 徐鹏 孙效文 中国水产科学研究院珠江水产研究所广东 广州 上海海洋大学水产与生命学院上海 中国水产科学研究院北京 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江 哈尔滨 摘要 采用结合技术对 个家系 个乌鳢个体雌雄各 个进行性别差异标记 的筛选 首先构建了雌雄基因池各 个个体 然后用 对微卫星引物对其进行扫描发 现 对引物 在雌雄基因池间扩增出差异条带 且都出现在 雌性基因池中 用构建基因池的 个个体对 对引物进行第一轮单个体验证 和 在基因池中扩增出的差异条带仅在极个别个体中出现而 的差异条带在 绝大多数的雌性个体中被成功扩增出来雄性个体皆无 用其余的 个个体对 进 行第二轮单个体验证得到同样结果 对 在 个雌性个体中扩增出来的差异基因 片段进行克隆并测序 将 个个体的测序结果用 进行多序列比对证实各个个体 得到的条带是同一序列该序列长度为 以为重复单位含量为 通过 比对发现在 数据库中无同源性序列存在 经统计此差异标记在雌性乌 鳢中出现的概率为 即该标记对该家系乌鳢性别的正确判别率为 关键词 乌鳢 微卫星 性别差异 混合分离群体法 中图分类号 文献标识码 乌 鳢 和 斑 鳢 内外已有一些鱼类的性别特异性标记的报道如罗 同属 鲈 形 目 鳢 科 非鱼 鳟 半滑舌鳎 鳢属 俗名为生鱼 黑鱼等 圆斑星鲽 因其具有生肌补血等药用价值且肉嫩刺少深受消 大 鳞 副 泥 鳅 等 费者喜爱 加上适应性强 目前是我国重要的养殖品 种 乌鳢比斑鳢分布广以食小杂鱼冰鲜鱼为主 简单重复序列 较难驯食人工配合饲料养殖成本较高 在养殖实 又称为微卫星是均匀分布于真核生 践中人们发现以乌鳢作为父本与斑鳢杂交的代 物基因组中的简单重复序列由 个核苷酸的 综合了亲本的优点且其雌雄个体生长速度差异很 串联重复片段构成 目前广泛应用于品种鉴定 大成鱼中雄性平均体重超过雌性的 倍 因此开 遗传多样性分析重要性状标记筛选和遗传图谱 展杂交鳢全雄育种技术研究对于提高杂交鳢的养 的构建等领域 分离群体分组